がん微小環境におけるDKK1/3-CKAP4シグナルの機能解明と新規治療法の開発

阐明DKK1/3-CKAP4信号在癌症微环境中的功能并开发新的治疗方法

基本信息

批准号：
22K15511
负责人：
佐田遼太
金额：
$ 3万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15511/
关键词：
DKK1 CKAP4 膵がん肝がん腫瘍免疫腫瘍微小環境 Wntシグナルがん微小環境

项目摘要

私共はWntシグナル制御因子である分泌蛋白DKK1の新規細胞膜受容体CKAP4を同定し、種々のがんにおいてDKK1-CKAP4シグナルによる細胞増殖機構を明らかにしてきた。難治性がんにおけるDKK1-CKAP4シグナルとがん微小環境との関連については世界中で解析が進んでいないが、近年、様々ながんの微小環境においてDKK1が免疫調節活性を示すことが報告されている。私は本研究において、DKK1-CKAP4シグナルと腫瘍免疫の関連に特に着目して解析を行っている。令和４年度はhydrodynamic tail vein injection（HTVi）法を用いてDKK1および活性型CTNNB1、MET遺伝子を正常免疫マウス肝臓に発現させ、多発肝がんを作製するモデルを確立した。核出した腫瘍を解析し、DKK1タンパクの発現と、マウス血液中への分泌を確認した。しかし対照腫瘍と比較してDKK1発現腫瘍で肝腫瘍のサイズや個数に有意な差を認めず、免疫組織染色による評価では腫瘍微小環境に浸潤するCD4/8陽性T細胞の数に有意な変化を認めなかった。そこで、複数のがんドライバー遺伝子の組み合わせ、及びネオアンチゲン遺伝子を同様にHTVi法で肝臓に導入するモデルを作製した。同モデルにおいて得られた多発肝がんは、導入した遺伝子をそれぞれ異なる割合で発現し、多彩な組織像を示すことを確認した。現在、同モデルにおいてDKK1-CKAP4シグナル依存性の表現型を解析中である。また私は令和4年度にドキシサイクリン誘導性にDKK1およびネオアンチゲンを発現するマウス膵がんオルガノイドを正常免疫マウスの同所に移植するマウス膵がんモデルを作製した。ネオアンチゲン発現によって抗腫瘍免疫応答を誘導することに成功しており、現在、DKK1発現単独による表現型を解析中である。

我们已经确定了分泌蛋白DKK1的新的细胞膜受体CKAP4，该蛋白DKK1是Wnt信号控制因子，并使用各种癌症上的DKK1-CKAP4信号阐明了细胞生长机制。 DKK1-CKAP4 DKK1-CKAP4信号和癌症财务环境尚未在世界范围内进行分析，但近年来，据报道，DKK1表明在各种显微镜环境中都有免疫调整的活动。在这项研究中，我特别关注DKK1-CKAP4信号与肿瘤免疫之间的关系。在Ordin的第四年，建立了流体动力学尾静脉注射（HTVI）定律，以建立一种模型，通过表达DKK1和活性CTNNB1并在正常的免疫小鼠肝脏中产生多种催眠癌。分析了核肿瘤，并证实了DKK1蛋白的表达和小鼠血液中的分泌。然而，与对比肿瘤相比，DKK1表达肿瘤没有识别出肝肿瘤的大小和数量的显着差异，并且在评估免疫组织染色时，CD4/8阳性T细胞的数量发生了显着变化。浸润肿瘤微观环境。因此，通过HTVI方法创建了多种多种癌症驱动基因和新抗原基因的模型。已确认在模型中获得的多层癌以不同的比例表示引入的基因，并显示了各种组织图像。当前，我们正在分析模型中DKK1-CKAP4信号依赖性的表达类型。我还创建了一个小鼠胰腺癌模型，该模型在原产地的第四会计年度表达了DKK1和NEO抗原，该抗原的原产地表达了DKK1和NEO抗原与正常免疫小鼠相同的位置。 NEO抗原表达成功地诱导了抗肿瘤免疫反应，目前仅通过DKK1表达来分析表达类型。