関節リウマチ骨破壊に関わる細胞間ネットワークを制御するADAM10の機能解明

阐明 ADAM10 的功能，该蛋白控制参与类风湿性关节炎骨质破坏的细胞间网络

• 批准号: 21K16293
• 负责人: 石井 翔
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16293/
• 关键词: ADAM10; 関節リウマチ; 骨芽細胞; 破骨細胞; RANKL

ADAM10(A disintegrin and metalloprotease 10)は、ADAM familyに属する膜結合型プロテアーゼであり、30種類以上の膜タンパク質を切断する。これまでADAM10は関節リウマチの滑膜組織に高発現しており、滑膜線維芽細胞や血管内皮細胞において炎症細胞浸潤や血管新生に関与すると報告されている。本研究では、関節リウマチの骨破壊において中心的な役割を有する破骨細胞および骨芽細胞においてどのような役割を要するかを解明する。これまでの研究実績として、ヒト骨肉腫由来骨芽細胞(MG-63)、関節リウマチ患者の骨組織より分離培養した骨芽細胞（RA-HOB）における炎症性サイトカインの産生能、ADAM10の発現について確認している。MG-63、RA-HOBをTNF-αで刺激し、培養液上清中のサイトカインの濃度をELISA法により測定したところ、非刺激群と比べ、培養液上清中のMCP-1、ICAM-1、RANTES、ENA78、IL-8が増加した。また免疫蛍光抗体法を用いて、MG-63、RA-HOBにおけるADAM10の発現について検討したところ、MG-63、RA-HOBにはADAM-10が発現していた。MG-63、RA-HOBをTNF-αで刺激し、qPCR法でADAM10のmRNAを測定したところ、ADAM10の発現が亢進した。以上の結果からADAM10は関節リウマチの骨芽細胞に発現しており、その炎症に関与している可能性が示唆される。今後、ADAM10の更なる機能解析を行う方針である。

ADAM10（崩解蛋白和金属蛋白酶10）是一种属于Adam家族的膜结合蛋白酶，裂解了30多种类型的膜蛋白。到目前为止，ADAM10在类风湿关节炎的滑膜组织中高度表达，据报道参与滑膜成纤维细胞和血管内皮细胞中的炎症细胞侵袭和新生血管化。这项研究将阐明其在破骨细胞和成骨细胞中所扮演的作用，这些作用在类风湿关节炎中具有核心作用。先前的研究结果已被证实，可以表明产生炎性细胞因子的能力和ADAM10在源自人骨肉瘤（MG-63）的成骨细胞中的表达，成骨细胞（RA-HOB）与类风湿性炎性炎的患者的骨组织分离。用TNF-α刺激MG-63和RA-HOB，与非刺激组相比，通过ELISA测量了培养上清液中细胞因子的浓度，而MCP-1，ICAM-1，RANTES，ENA78和IL-8在培养上清液中的浓度增加。此外，当我们使用免疫荧光免疫测定法调查了MG-63和RA-HOB中ADAM10的表达时，ADAM-10在MG-63和RA-HOB中表达。用TNF-α刺激MG-63和RA-HOB，并通过qPCR测量ADAM10的mRNA，并增加了ADAM10的表达。上述结果表明，ADAM10在类风湿关节炎的成骨细胞中表达，可能参与其炎症。将来，我们计划进一步分析ADAM10的功能。

项目成果

関節リウマチ患者の骨芽細胞におけるサイトカイン産生能とADAM-10の発現

类风湿关节炎患者成骨细胞细胞因子产生能力及ADAM-10表达

• 发表时间: 2022
• 作者: 村上輝明;山口勇太;森田貴義;加藤保宏;平田春彦;武田吉人;熊ノ郷淳;石井 翔
• 通讯作者: 石井 翔