関節リウマチの骨破壊における12-HETEの機能

12-HETE在类风湿性关节炎骨质破坏中的作用

• 批准号: 22K16725
• 负责人: 佐野 有隆
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16725/
• 关键词: 関節リウマチ; 脂質メディエーター; 12-HETE; 変形性膝関節症; 滑膜繊維芽細胞; 人工関節置換術; 骨破壊

関節リウマチ (RA)は、全身の関節炎をきたし、骨や軟骨が破壊され、関節機能が損なわれる炎症性疾患である。また多くの脂質メディエーターは炎症を惹起するが、近年、抗炎症作用を有する脂質メディエーターが知られている。リピドミクスを用いてRA患者とOA患者の関節滑液の脂質メディエーターを網羅的に比較解析したところ、炎症性のものに加え、抗炎症作用を有する脂質メディエーターの濃度も、RA患者で有意に高値であった。また、ROC曲線から、12-HETEは、RAとOAを区別する最も優れたバイオマーカーになる可能性が示されたが、RAにおける役割は不明である。本研究ではRAにおける12-HETEの機能を解析することを目的とした。本年度ではまず、① RA滑膜線維芽細胞における12-HETEの受容体であるGPR31およびBLT2の発現解析を行なった。人工膝関節全置換術(TKA)の際に採取したOA、RA関節滑膜の凍結切片を作製した。OA、RA滑膜でのGPR31およびBLT2の発現を解析した。結果、GPR31、BLT2ともにRAでOAと比較し有意に高値であった。次に、② 12-HETEがRA滑膜線維芽細胞の活性化を惹起するかを検証した。RA滑膜から滑膜線維芽細胞を単離・培養した。培養した滑膜線維芽細胞に、12-HETEを0、10、30、100 nMを添加後、0、6、12、24時間刺激し、その活性化をELISAで評価した。刺激濃度、時間では、有意差は認められなかった。そこで、滑膜線維芽細胞の発現ではなく、破骨細胞を評価することにした。③採取したRA滑膜から破骨細胞を分化培養し12-HETEで刺激した。生理食塩水で刺激するものと比較し、NFATc1 mRNAの発現は時系列を追っても、48時間まで高発現であった。

类风湿性关节炎 (RA) 是一种炎症性疾病，会导致全身性关节炎、破坏骨骼和软骨并损害关节功能。此外，许多脂质介质会引起炎症，但近年来，已知具有抗炎作用的脂质介质。利用脂质组学对RA和OA患者滑液中的脂质介质进行全面比较分析发现，除了炎症性脂质介质外，RA患者中具有抗炎作用的脂质介质浓度显着较高。此外，ROC曲线显示12-HETE可能是区分RA和OA的最佳生物标志物，但其在RA中的作用尚不清楚。本研究的目的是分析12-HETE在RA中的功能。今年，我们首先分析了 RA 滑膜成纤维细胞中 12-HETE 受体 GPR31 和 BLT2 的表达。制备全膝关节置换术（TKA）期间收集的 OA 和 RA 关节滑膜的冰冻切片。我们分析了 OA 和 RA 滑膜中 GPR31 和 BLT2 的表达。结果，RA 中的 GPR31 和 BLT2 均显着高于 OA。接下来，(2)我们验证了12-HETE是否诱导RA滑膜成纤维细胞的活化。从RA滑膜中分离并培养滑膜成纤维细胞。添加0、10、30和100nM的12-HETE后，刺激培养的滑膜成纤维细胞0、6、12和24小时，并通过ELISA评估激活情况。刺激浓度或时间没有观察到显着差异。因此，我们决定评估破骨细胞而不是滑膜成纤维细胞的表达。 ③从收集的RA滑膜中分化培养破骨细胞，并用12-HETE刺激。与生理盐水刺激相比，NFATc1 mRNA 表达随着时间的推移而高表达长达 48 小时。

项目成果

重症変形性膝関節症患者にNSAIDsを投与してもプロスタグランディンは低下しない

给患有严重膝骨关节炎的患者服用非甾体抗炎药不会降低前列腺素水平

• 发表时间: 2022
• 作者: 佐野有隆;李賢鎬;菅順一郎;栁澤正彦;中西一義
• 通讯作者: 中西一義

関節リウマチと変形性膝関節症患者の膝関節滑液中の炎症性および抗炎症性脂質メディエーターの網羅的解析

类风湿关节炎和膝骨关节炎患者膝关节液中炎症和抗炎脂质介质的综合分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 佐野有隆;李賢鎬;龍啓之助;中西一義
• 通讯作者: 中西一義

関節リウマチおよび変形性膝関節症患者由来の滑膜マスト細胞でのDNAおよびmiRNA発現の相違

类风湿关节炎和膝骨关节炎患者滑膜肥大细胞DNA和miRNA表达的差异

• 发表时间: 2022
• 作者: 李賢鎬;佐野有隆;豊島翔太;岡山吉道;中西一義
• 通讯作者: 中西一義