Mechanism of unanchored polyubiquitin chain production

非锚定多聚泛素链的产生机制

基本信息

批准号：
24659099
负责人：
HATTORI Akira
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

Recently, it has been reported that unanchored Lys63-linked polyubiquitin chains can act as a scaffold protein linking TAK1 and TAB2 in the NF-kappaB signaling pathway. In this study, we synthesized a novel fluorogenic substrate, x3Ub(G76V)-Ub-AMC and an activity-based probe, x3Ub(G76V)-Ub-VS, which enable detection of the unanchored polyubiquitin chain-liberating activity by a native chemical ligation strategy. We showed that the activity profile for the x3Ub(G76V)-Ub-AMC hydrolysis in MonoQ fractions of HeLa cell extract was different from those for Ub-AMC and Ub-GrB hydrolysis, suggesting a possibility of the substrate for endo-cleavage type deubiquitinating enzymes. We also revealed that the x3Ub(G76V)-Ub-AMC hydrolyzing activity in HT1080 cells was attenuated by tumor necrosis factor stimulation, suggesting an involvement of endo-cleavage type deubiquitinating enzymes in inflammatory responses.

最近，据报道，未锚定的Lys63连接的聚泛素链可以充当NF-kappab信号通路中的TAK1和TAB2的脚手架蛋白。在这项研究中，我们合成了一种新型的荧光底物X3UB（G76V）-UB-AMC和基于活动的探针X3UB（G76V）-UB-VS，该探针可以通过天然化学化学化学活性检测到未经恒定的多偶联蛋白链纤维连接策略。我们表明，HeLa细胞提取物中X3UB（G76V）-UB-AMC水解的活性曲线与UB-AMC和UB-GRB水解的Hela细胞提取物中的活性曲线不同，这表明底物有可能进行内溶性裂解类型去泛素化。酶。我们还透露，HT1080细胞中的X3UB（G76V）-UB-AMC水解活性通过肿瘤坏死因子刺激减弱，这表明炎症反应中的内裂型去泛素化酶的参与。

项目成果

期刊论文数量（26）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Chemical tagging of a drug target using 5-sulfonyl tetrazole

使用 5-磺酰四唑对药物靶标进行化学标记

DOI：
10.1016/j.bmcl.2013.01.092
发表时间：
2013
期刊：
Bioorg Med Chem Lett
影响因子：
2.7
作者：
Otsuki S;Nishimura S;Takabatake H;Nakajima K;Takasu Y;Yagura T;Sakai Y;Hattori A;& Kakeya H
通讯作者：
& Kakeya H

脱Urm1化活性の検出および分子同定

de-Urm1活性检测及分子鉴定

DOI：
发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kishimoto S;Tsunematsu Y;Nishimura S;Hayashi Y;Hattori A;& Kakeya H;青木豊,朴錦花,小林万祐子,服部明,掛谷秀昭;小林万祐子,服部明,青木豊,掛谷秀昭
通讯作者：
小林万祐子,服部明,青木豊,掛谷秀昭

Exon 10 Coding Sequence Is Important for Endoplasmic Reticulum Retention of Endoplasmic Reticulum Aminopeptidase 1

外显子 10 编码序列对于内质网氨肽酶 1 的内质网保留很重要