デザインされた誘発Dicによる微小核/クロモトリプシス形成過程の解析

设计诱导Dic分析微核/染色体碎裂形成过程

基本信息

  • 批准号:
    18K11647
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.83万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2018
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2018-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

電離放射線がゲノムDNAに引き起こすDNA二本鎖切断(DSB)の一部は、異なった切断端が再結合した場合に染色体転座や二動原体染色体などの染色体異常となる。一つの染色体に2つのセントロメアを持つ二動原体染色体および同時に生じる染色体断片は、細胞分裂終了後に細胞核に取り込まれることなく微小核(MN)形成を形成することが多く、微小核は細胞質の自然免疫応答機構を介して炎症応答を惹起し、次の細胞周期で核内に取り込まれ修復されることにより複雑に融合した異常染色体(クロモトリプシス)の原因となる。この経路を効率よく解析するために誘導実験系の確立を試みている。前年度までに作成したiCre-loxPあるいはERT2-Creでは、Dicの誘導効率が10^-7程度と低く解析に十分な細胞数を得ることができなかった。他方で一過性導入系のCRISPR-Cas9を用いた染色体異常誘導系として、多発性骨髄腫で観察される11番染色体CCND1遺伝子および14番染色体IgH遺伝子間のt(11;14), 線維形成性小細胞腫瘍の11番染色体WT1遺伝子と22番染色体EWSR1遺伝子間のt(11;22), 非小細胞肺がんの5番染色体CD74遺伝子と6番染色体ROS1遺伝子間のt(5;6)誘導時に、それぞれの特異的転座と同時に同じ組み合わせの二動原体染色体が生じていることをゲノムDNAを用いたPCRにより確認できた。Dicの消長の過程の細胞応答を効率よく調べるため、今後、Dicの生成を蛍光タンパク質の発現でモニターしDicが生じた細胞を単離できる実験系を開発し、遺伝子発現の変化の網羅的解析を試みる。
由于基因组DNA中电离辐射引起的一些DNA双链断裂(DSB)导致染色体异常,例如染色体易位和双胶质体染色体,当不同的切割终止重聚。在一个染色体上和同时发生的染色体片段上,通常形成微核酸(MN)形成的双中心染色体,并同时发生染色体片段,而无需在细胞分裂完成后被核所吸收,而微核中的细胞核通过微核的炎症反应通过固有的范围和细胞核的临床响应而造成炎症,并在细胞中的临时响应,并在细胞中被取消,并被逐渐成立的细胞和细胞状态。异常染色体(染色体)。我们正在尝试建立一个指导实验系统,以有效地分析这一路径。随着ICRE-LOXP或ERT2-CRE创建到上一年,DIC的诱导效率在10^-7左右较低,因此无法获得足够的细胞计数进行分析。另一方面,作为使用瞬态转导系统CRISPR-CAS9作为一种染色体畸变诱导系统,PCR使用基因组DNA证实,比基诺克尔染色体的相同组合是与每个染色体的特定易位11 cccnd1 Genes and Chromosome cccnd1 Genes soppers cccnd1 Genes eyela comports contortial cccnd1 Genes comports contory contory comportase consports cccnd1 Genes eyela corporces in to process of totory corporces of to process(染色体WT1基因和染色体22 EWSR1基因在纤维形成的小细胞肿瘤中,在非小细胞肺癌中染色体CD74基因和染色体6 ROS1基因之间的T(5; 6)。为了在DIC变化过程中有效研究细胞反应,我们现在将开发一个实验系统,该系统通过荧光蛋白的表达和分离已产生的细胞的表达来监测DIC的产生,并试图全面分析基因表达的变化。

项目成果

期刊论文数量(23)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
CRISPR/Cas9を用いた染色体転座t(11;14) 誘導系の作製と染色体異常解析への応用
利用CRISPR/Cas9构建染色体易位t(11;14)诱导系统并应用于染色体异常分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    津山尚宏;阿部悠;柳亜紀;菅井美咲;神谷研二;坂井晃
  • 通讯作者:
    坂井晃
Optimization of chromosome specimen preparation for biodosimetry using chromosome aberration frequency.
使用染色体畸变频率优化用于生物剂量测定的染色体样本制备。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Naohiro Tsuyama;Yu Abe;Misaki Sugai-Takahashi;Kenichi Kudo;Yusuke Azami;Miwa Fukami;Tomisato Miura;Kenji Kamiya;Akira Sakai
  • 通讯作者:
    Akira Sakai
Analysis of the number of chromosome aberrations induced by three consecutive CT examinations.
连续3次CT检查诱发的染色体畸变数量分析。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yu Abe;Hideyoshi Noji;Misaki Sugai;Yumiko Kurosu;Naohiro Tsuyama;Aki Yanagi;Yukari Yanai;Takashi Ohba;Tetsuo Ishikawa;Tomisato Miura;Kenji Kamiya;Mitsuaki A. Yoshida;Akia Sakai
  • 通讯作者:
    Akia Sakai
Investigation of the cumulative number of chromosome aberrations induced by three consecutive CT scans.
研究连续 3 次 CT 扫描诱发的染色体畸变累积数量。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2018
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yu Abe;Hideyoshi Noji;Misaki Sugai;Yumiko Kurosu;Takashi Ohba;Naohiro Tsuyama;Aki Yanagi;Yukari Yanai;Tetsuo Ishikawa;Tomisato Miura;Kenji Kamiya;Mitsuaki A Yoshida;Akira Sakai
  • 通讯作者:
    Akira Sakai
Induction of sequence-specific chromosomal aberration using CRISPR/Cas9 and Cre-loxP.
使用 CRISPR/Cas9 和 Cre-loxP 诱导序列特异性染色体畸变。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2020
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Naohiro Tsuyama;Yu Abe;Misaki Sugai;Yusuke Azami;Ken-ichi Kudo;Kenji Kamiya;Akira Sakai.
  • 通讯作者:
    Akira Sakai.
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  • 发表时间:
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    0
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    G.;Ralsznr;T.;Masujima;橋本亮太;津山 尚宏;Hashimoto R.;Gary Salazar;Rie Tsuchida
  • 通讯作者:
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    0
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  • 通讯作者:
    Halil Ersin Soken and Shin-ichiro Sakai
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用 TRIAD 滤波方法估计时变磁力计误差
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    5.6
  • 作者:
    川村 文彦;稲木 誠;片渕 淳;阿部 悠;津山 尚宏;黒須 由美子;柳 亜希;樋口 光徳;武藤 哲史;山浦 匠;鈴木 弘行;野地 秀義;鈴木 眞一;吉田 光明;笹谷 めぐみ;神谷 研二;小野寺 雅史;坂井 晃;Halil Ersin Soken and Shin-ichiro Sakai;Halil Ersin Soken and Shin-ichiro Sakai
  • 通讯作者:
    Halil Ersin Soken and Shin-ichiro Sakai
一細胞ダイレクトMS法による細胞分化の指標分子探索
利用单细胞直接质谱法寻找细胞分化的指示分子
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    津山尚宏;水野初;原田隆範;西垣俊太;升島努;前田昌子;檜山英三;津山 尚宏;津山 尚宏;水野 初;水野 初;Takahashi N;津山尚宏
  • 通讯作者:
    津山尚宏
Live Single-cell MSによる肝細胞薬物代謝能の多様性解析
利用活体单细胞MS分析肝细胞药物代谢能力的多样性
  • DOI:
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    津山 尚宏;深野 泰史;水野 初;伊達 沙智子;原田 隆範;升島 努
  • 通讯作者:
    升島 努

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知道了