望ましい脂質摂取バランスのあり方の探究～胆石モデルマウスを用いた検討～

探索理想的脂质摄入平衡 - 使用胆结石模型小鼠的研究 -

• 批准号: 20K02391
• 负责人: 横山 英子
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: The University of Nagano
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K02391/
• 关键词: コレステロール; 糖脂質; ガングリオシド; 肝臓; MALDI-TOF MS; リピドーム; ガングリオシドGM2; 中性脂肪; リン脂質; 胆石; 脂質代謝; 胆石モデルマウス; 遺伝子発現; 機器分析

前年度から引き続き、高コレステロール食(1.5%コレステロール+0.5%コール酸)を負荷したマウスと野生型マウスの肝臓から抽出したガングリオシドの解析を実施した。 1. 野生型マウス(コントロール食投与)、2. 野生型マウス(高コレステロール食投与)3. PPARalphaノックアウトマウス(コントロール食 投与)4. PPARalphaノックアウトマウス(高コレステロール食投与)の4群のマウスの肝臓から抽出した脂質のうち、ガングリオシドGM2と推定される脂質については、上述の１群から３群のサンプルから得られた分子イオンのピークは、1454.9付近（M-H)-、4群のPPARalphaノックアウトマウス(高コレステロール食投与)で、質量分析においては、高分子側にm/z４２移動した1496.9付近（M-H)-にピークが得られたことからセラミド部分、脂肪酸か長鎖塩基に起因するに違いがあるものと推察された。そこで、令和４年度は、セラミド部分の解析を狙って、リピドーム解析を実施した（外部委託）。しかしながら、その結果は、１群から３群の主要ガングリオシドはGM3、4群はGT1aであると判定され、前年度に実施したMALDI-TOF MSの分析結果とかなり乖離していた。TLC上での挙動とも一致しない結果であった。さらに、マウス肝臓のガングリオシドはN-グリコリル型のシアル酸を発現していると考えられるので、その確認を含め、再解析が必要であると判断して目下実施している。それから、遺伝子発現実験のために、肝臓サンプルからRNAの抽出を始めている。

从上一年开始，我们对富含高胆固醇饮食（1.5％胆固醇 + 0.5％胆酸）和野生型小鼠的小鼠肝脏提取的神经节苷脂进行了分析。 1。野生型小鼠（通过对照饮食施用），2。野生型小鼠（通过高胆固醇饮食给药）3。pParalpha敲除小鼠（通过对照饮食施用）4。PPARALPHA敲除小鼠（由高胆固醇饮食施用）是估计的脂质脂肪中的脂质脂肪中的lipids fiver pariose gm2 gm2 fiver parliose gm2 car估计敲除小鼠（通过高胆固醇饮食给药），据估计为GM2，分子离子的峰从上面的1至3组的样品中获得，在上述组中，大约1454.9（M-H） - （M-H） - （M-H） - ，在质谱中，在质谱中获得了峰值，在质量光谱中获得了1496.9（M-H）的峰值，M/Z（M/Z），M/Z 42（M/Z），M////z（M//z） - ///z），42据估计，由于神经酰胺部分，脂肪酸或长链碱基，存在差异。因此，在2022财年中，进行了（外包），以分析神经酰胺部分。但是，确定第1至3组的主要神经毒剂的结果为GM3，对于4组的GT1A，该结果与上一年进行的MALDI-TOF MS分析结果显着不同。结果与TLC上的行为不符。此外，由于人们认为小鼠肝脏中的神经节苷脂表达了N-糖基唾液酸，因此我们目前正在进行此过程，并确定有必要重新分析，包括确认。然后，对于基因表达实验，开始从肝样品中提取RNA。