ナノスーツ法を用いた血中循環HPV感染細胞のリアルタイムモニタリング法の確立

纳米服法实时监测循环HPV感染细胞方法的建立

• 批准号: 20K18249
• 负责人: 喜夛 淳哉
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18249/
• 关键词: ナノスーツ法; 腫瘍循環細胞(CTC); リキッドバイオプシー; 中咽頭癌; HPV

ナノスーツ法は短時間で簡便に電界放出型走査型電子顕微鏡で立体構造が保たれたまま高倍率・高分解能で観察できる革新的な技術である。循環腫瘍細胞(Circulating Tumor Cells: CTC)は、血液腫瘍マーカーよりも病勢や治療効果を反映する可能性が示唆されており注目されている。CTCをナノスーツ法で観察する新手法を確立し、HPVに感染したCTCを微細構造が保たれた状態で観察及びリアルタイムでモニタリングを行うことで、HPV陽性中咽頭癌の病勢や予後判定を行うことや早期癌スクリーニングへの応用も目指す。HPV粒子観察技術の確立を目的とし、HPVタイプ6又はタイプ11が陽性となった喉頭乳頭腫を用い検討を行った。免疫染色でHPV-L1(カプシド蛋白)陽性部位において、ナノスーツ法で観察すると約50nmの微小粒子を核内に多数認めた。透過型電子顕微鏡を用いて同一部位を観察(戻し電顕法)においても約50nmの微小粒子を多数認めた。これらからHPV粒子が観察されたものと判断した。さらにHPV粒子が観察される喉頭乳頭腫は予後不良な症例が多いことが明らかとなり、論文報告を行った。しかし、現状では培養細胞を用いたCTCを模倣したモデルによりHPV粒子の同定を試みているが、有望な結果は得られていない。一方で、一部ではHPV陽性中咽頭癌が関与されるとする原発不明癌症例のCell free DNA解析において、HPV-DNA解析が有用な新規バイオマーカーとなる可能性が判明した。本知見のCTCへの応用は可能か、CTCでのHPV粒子観察の検討に加え、解析中である。

纳米服方法是一项创新技术，可以使用场发射扫描电子显微镜在短时间内进行高放大倍率和高分辨率观察，同时保留三维结构。循环肿瘤细胞（CTC）引起了人们的关注，因为它们被认为比血液肿瘤标志物更能反映疾病状态和治疗效果。建立一种利用纳米服法观察CTC的新方法，在保留精细结构的情况下观察HPV感染的CTC，并实时监测它们，以确定HPV阳性口咽癌的疾病状态和预后。到早期癌症筛查。为了建立HPV颗粒观察技术，我们使用HPV 6型或11型阳性的喉乳头状瘤进行了调查。在免疫染色的HPV-L1(衣壳蛋白)阳性部位，用纳米套装法观察时，在细胞核内观察到许多50nm左右的微粒。当使用透射电子显微镜(返回电子显微镜)观察同一部位时，观察到许多约50nm的微粒。确定从中观察到HPV颗粒。此外，很明显，许多观察到 HPV 颗粒的喉乳头状瘤病例预后不良，我们在一篇论文中报道了这一点。然而，目前正在尝试使用培养细胞模拟 CTC 的模型来识别 HPV 颗粒，但尚未获得有希望的结果。另一方面，已发现 HPV-DNA 分析可能是原发性不明癌症病例无细胞 DNA 分析中有用的新生物标志物，这些癌症病例被认为与 HPV 阳性口咽癌有关。除了使用 CTC 检查 HPV 颗粒观察之外，我们目前正在分析这些知识是否可以应用于 CTC。

项目成果

当院における軟骨伝導補聴器外来の現状

我院门诊软骨传导助听器现状

• 发表时间: 2020
• 作者: 喜夛淳哉;中西啓;峯田周幸
• 通讯作者: 峯田周幸

頸部の腫瘤

颈部肿块

• 发表时间: 2020
• 作者: 喜夛淳哉; 中西啓; 峯田周幸
• 通讯作者: 峯田周幸

A Case of Encephalocele in the Temporal Bone Repeating Intracranial Infection

颞骨脑膨出颅内重复感染一例

• DOI: 10.5631/jibirin.114.347
• 发表时间: 2021
• 作者: 中西啓; 喜夛淳哉; 新村和也; 馬場聡; 峯田周幸
• 通讯作者: 峯田周幸

Two Cases of Sniff-Type Patulous Eustachian Tube

嗅探式咽鼓管扩张二例

• DOI: 10.5631/jibirinsuppl.156.217
• 发表时间: 2021
• 作者: Endo Shiori;Mizuta Kunihiro;Oishi Hiroto;Ikeba Hiroshi;Kita Junya;Ban Akihiro;Nakanishi Hiroshi;Takizawa Yoshinori;Arai Maki;Morita Sho;Hosokawa Kumiko;Misawa Kiyoshi;Hosokawa Seiji;Takebayashi Satoru;Mineta Hiroyuki
• 通讯作者: Mineta Hiroyuki

当院におけるCDH23遺伝子バリアント例における聴力像の検討

我院CDH23基因变异病例听力影像检查

• 发表时间: 2022
• 作者: 中西 啓; 喜夛 淳哉; 新村 大地; 西尾 信哉; 宇佐美 真一; 三澤 清
• 通讯作者: 三澤 清