Generation of neuroblastoma patient-derived PDX library covering all subtypes

生成涵盖所有亚型的神经母细胞瘤患者来源的 PDX 文库

基本信息

批准号：
21H02880
负责人：
梅田雄嗣
金额：
$ 11.07万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02880/
关键词：
神経芽腫異種移植モデル免疫不全マウス

项目摘要

本研究では、強力な集学的治療を施行しても依然として予後不良な難治性神経芽腫に対して、個々の患者の分子病態に立脚した新規治療薬の開発と実用的なin vivo薬剤スクリーンニングが実現可能な患者由来異種移植（PDX）モデルを作成することを目的とする。全国の医療機関が参加する日本小児がん研究グループ（JCCG）を母体とした小児固形腫瘍観察研究の付随研究として、前向き観察研究「神経芽腫患者由来異種移植ライブラリーの構築」を2021年6月より開始した。研究開始から約1年9ヶ月が経過した時点で、研究参加を希望した55施設中38施設で施設承認が得られた。11施設から19症例の神経芽腫の新鮮腫瘍組織が提供され、得られた腫瘍組織は順次免疫不全マウスに移植してPDXマウスの樹立を進めている。また、生着した腫瘍の表現型解析及びサブグループの特定に向けて、残余腫瘍及び正常血液の保存を継続して実施している。ALK遺伝子異常は神経芽腫の約8から10%に認められ、この異常を有するサブグループは予後が極めて不良である。標準的な化学療法及びALK阻害剤に治療抵抗性を示した再発神経芽腫症例の検体を用いた網羅的遺伝子解析により、初発時・増悪時検体から新規のBEND5-ALK融合遺伝子、増悪時検体からFGFR1遺伝子変異を同定した。この患者の増悪時検体よりPDXマウスを樹立し、シングルセルRNAシーケンスを含めたマルチオミックス解析によるALK遺伝子異常を有する神経芽腫の治療抵抗性クローンの出現形式およびALK阻害剤耐性機序の獲得メカニズムの解析、及び新規ALK阻害剤や他の分子標的薬の併用療法のin vivo薬剤感受性試験などを進めていく。さらに他のサブグループにおいても分子標的薬を用いたin vivo薬剤感受性試験を進めていく予定である。

在这项研究中，我们将根据个体患者的分子病理学和针对难治性神经母细胞瘤的实用体内药物筛选来开发新的治疗药物，即使经过强化的多学科治疗，其预后仍然很差。这项研究的目的是创建一个患者。可用于临床试验的衍生异种移植（PDX）模型。一项前瞻性观察性研究“神经母细胞瘤患者来源的异种移植文库的构建”将于 2021 年 6 月进行，作为日本儿童癌症研究组 (JCCG) 领导的儿科实体瘤观察研究的配套研究，该研究涉及全国医疗机构。事情从五月份开始。研究开始后大约 1 年零 9 个月，请求参与该研究的 55 家机构中有 38 家获得了机构批准。 11个机构提供19例神经母细胞瘤的新鲜肿瘤组织，将获得的肿瘤组织相继移植到免疫缺陷小鼠体内建立PDX小鼠。此外，我们正在继续保存残留肿瘤和正常血液，用于移植肿瘤的表型分析和亚组的鉴定。大约 8% 至 10% 的神经母细胞瘤中发现 ALK 基因异常，存在这种异常的亚组预后极差。使用对标准化疗和 ALK 抑制剂耐药的复发性神经母细胞瘤病例的标本进行综合遗传分析，发现在初次发病和恶化时的标本中发现了一种新的 BEND5-ALK 融合基因。根据该患者疾病进展时的标本建立 PDX 小鼠，包括单细胞 RNA 测序在内的多组学分析揭示了具有 ALK 基因异常的神经母细胞瘤的治疗耐药性克隆的出现以及 ALK 抑制剂耐药性的获得机制。我们将继续开展新型ALK抑制剂与其他分子靶向药物联合治疗的体内药敏试验。此外，我们计划使用其他亚组的分子靶向药物进行体内药敏测试。