唾液中の炎症サイトカイン測定による新しいインプラント予後評価法の開発

通过测量唾液中的炎症细胞因子开发新的种植体预后评估方法

基本信息

批准号：
20K10153
负责人：
石川誠
金额：
$ 2.08万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

インプラント周囲炎患者と非インプラント周囲炎患者の分子生物学的差異を比較解析するために①唾液中の炎症サイトカイン測定と②唾液中の免疫細胞の分画解析を行い、統合的にインプラント周囲炎のリスクファクターを探索するの本研究の目的であった。インプラント周囲炎の分子生物学的リスクファクターから予防の確立にむけた基盤的研究を行った。当研究グループでは本研究でまず予備的検討として、健常者と口腔内科疾患（口腔カンジダ症）患者の唾液と血液の炎症性サイトカイン濃度とCD45陽性免疫細胞の解析方法を行い、測定方法を確立できた。炎症性サイトカインの測定については、実際には200μLの唾液と1mLの血液から同時に７種類の分子を検索できるBD社製のCBA kitを使用した。この方法では7つの炎症性サイトカイン濃度(IFN-γ, TNF-α, IL-4,　5,　6,　10,　17A) を同時に計測可能であった。濃度既知の希釈液から算出した標準曲線をもとに、試料の蛍光強度をフローサイトメーター(FACS Aria-2) を用いて計測した。口腔カンジダ症患者14名の検討ではIL-17のサイトカイン濃度が低下していることがわかった。このことからインプラント予後不良患者でIL-17濃度が低下している可能性もあり、現在検討中である。また加えて、当研究グループでは健常者10名の唾液と血液のCD3陽性細胞、CD4陽性細胞、CD45陽性免疫細胞の免疫分画の解析を行った。これらの細胞は実際には200μLの唾液と1mLの血液から同時から解析可能であった。CD3、CD4陽性細胞は割合は少なかったが検出可能であった。さらに健常者の検体中の唾液中のCD45陽性細胞の割合は経年齢的に増える傾向になった。今後インプラント埋入患者の唾液検体を増やして、免疫視細胞の割合のさらなる検討をすすめていきたい。

为了比较分析种植体周围炎患者与非种植体周围炎患者之间的分子生物学差异，我们进行了1）唾液中炎症细胞因子的测定和2）唾液中免疫细胞的分数分析，综合分析了种植体周围炎患者和非种植体周围炎患者的分子生物学差异。本研究的目的是探讨危险因素。我们进行了基础研究，旨在根据种植体周围炎的分子生物学危险因素建立预防措施。作为一项初步研究，我们的研究小组对健康受试者和患有口腔内科疾病（口腔念珠菌病）的患者的唾液和血液中的炎症细胞因子浓度和CD45阳性免疫细胞进行了分析，并建立了测量方法。关于炎症细胞因子的测量，我们实际上使用了BD公司生产的CBA试剂盒，可以从200μL唾液和1mL血液中同时搜索七种类型的分子。通过该方法，可以同时测定7种炎症细胞因子（IFN-γ、TNF-α、IL-4、5、6、10和17A）的浓度。基于由已知浓度的稀释溶液计算出的标准曲线，使用流式细胞仪（FACS Aria-2）测量样品的荧光强度。在对14名口腔念珠菌病患者的研究中发现，IL-17的细胞因子浓度降低。这表明植入后预后不良的患者的IL-17水平可能会降低，目前正在对此进行研究。此外，我们的研究小组还分析了10名健康受试者唾液和血液中CD3阳性细胞、CD4阳性细胞和CD45阳性免疫细胞的免疫分数。实际上可以同时从 200 μL 唾液和 1 mL 血液中分析这些细胞。尽管CD3和CD4阳性细胞的比例较小，但仍可检测到。此外，健康受试者唾液中CD45阳性细胞的百分比往往随着年龄的增长而增加。未来，我们希望增加植入患者唾液样本的数量，并进一步研究免疫受体细胞的比例。