腎癌幹細胞は腫瘍内不均一性を示すか？ー淡明細胞型腎癌の根源的治療法を求めてー

肾癌干细胞是否表现出瘤内异质性？

基本信息

批准号：
20K09582
负责人：
近藤慶一
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

腎癌症例に対する手術検体からのサンプリングを継続し、Single cell化処理を継続している。コラゲナーゼをベースとした酵素カクテルを調整することで組織検体からSingle cellを効率的に分離することは可能であったが、分離効率とその後の培養下での生存率が相反してしまう。後述するような遺伝子を抽出して行う実験には十分な細胞量収集することは可能となり論文化できたことは幸いであった（Jikuya R et al. iScience 25, 2002）。しかし本来の目的である癌細胞・腫瘍内血管内皮細胞・線維芽細胞を単離し、それぞれの培養環境を最適化する試みを継続しているが、腫瘍内微小環境の再生に必要なレベルにまで増幅する技術は未だ得られていない。そのため本研究の最終年度も引き続き(1)酵素カクテルの組成など処理方法の改善並びに(2)Single cell化後の培養液や培養環境(ガス組成・温度など)の最適化を行い安定的なSingle cellからの培養技術の確立を目指していく。また前述の論文にあるように淡明細胞以外の組織についても同様のSingle cell化を行って病理組織に見られるような腫瘍内微小環境の違いを再構築し、組織型ごとに効果が異なる既存の腎癌治療薬及び新規候補薬を用いてその薬効薬理の違いを可視化することを目指す。分離効率と培養効率の相反性が改善し難い場合を考え、予備実験としてSingle cellではなく細胞塊を用いた実験系を考えている

继续对肾癌病例的手术标本进行取样，并继续进行单细胞处理。尽管通过制备基于胶原酶的酶混合物可以从组织标本中有效分离单细胞，但分离效率和随后的培养存活率相互矛盾。幸运的是，我们能够收集足够的细胞用于下面描述的基因提取实验，并能够在论文中发表结果（Jikuya R et al. iScience 25, 2002）。然而，分离癌细胞、瘤内血管内皮细胞和成纤维细胞并优化其各自培养环境（这是最初的目标）的尝试仍在继续，但尚未达到再生瘤内微环境所需的水平。扩增技术尚未获得。因此，在本研究的最后一年，我们将继续（1）改进酶混合物的成分等加工方法，以及（2）优化生产后的培养基和培养环境（气体成分、温度等）单细胞，确保稳定的单细胞我们的目标是建立从细胞开始的培养技术。此外，正如上述论文中提到的，透明细胞以外的组织可以以类似的方式转化为单细胞，以重建病理组织中看到的瘤内微环境的差异，我们的目标是可视化药物疗效和药理学的差异。使用肾癌疗法和新候选药物。考虑到分离效率和培养效率之间的相互关系难以提高的情况，我们正在考虑使用细胞团代替单个细胞的实验系统作为初步实验。

项目成果

期刊论文数量（1）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Single-cell transcriptomes underscore genetically distinct tumor characteristics and microenvironment for hereditary kidney cancers

单细胞转录组强调遗传性肾癌的遗传独特肿瘤特征和微环境

DOI：
10.1016/j.isci.2022.104463
发表时间：
2022-05-01
期刊：
iScience
影响因子：
5.8
作者：
Ryosuke Jikuya;Koichi Murakami;A. Nishiyama;I. Kato;M. Furuya;J. Nakabayashi;Jordan A. Ramilowski;H. Hamanoue;Kazuhiro Maejima;Masashi Fujita;Taku Mitome;S. Ohtake;G. Noguchi;Sachiko Kawaura;H. Odaka;T. Kawahara;M. Komeya;Risa Shinoki;Daiki Ueno;Hiroki Ito;Yusuke Ito;K. Muraoka;N. Hayashi;K. Kondo;N. Nakaigawa;K. Hatano;M. Baba;Toshio Suda;Tatsuhiko Kodama;S. Fujii;K. Makiyama;M. Yao;B. Shuch;Laura S. Schmidt;W. Linehan;H. Nakagawa;T. Tamura;H. Hasumi
通讯作者：
H. Hasumi

Single-cell transcriptomes underscore genetically distinct tumor characteristics and microenvironment for hereditary kidney cancers

单细胞转录组强调遗传性肾癌的遗传独特肿瘤特征和微环境

DOI：
10.1016/j.isci.2022.104463
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
5.8
作者：
Jikuya R; Murakami K; Nishiyama A; Kato I; Furuya M; Nakabayashi J; Ramilowski JA; Hamanoue H; Maejima K; Fujita M; Mitome T; Ohtake S; Noguchi G; Kawaura S; Odaka H; Kawahara T; Komeya M; Shinoki R; Ueno D; Ito H; Ito Y; Muraoka K; Hayashi N; Kondo K; et
通讯作者：
et