加齢性認知機能障害に対する新規治療法の開発を目的とした糖蛋白LRGの機能解析

糖蛋白 LRG 的功能分析，旨在开发年龄相关认知功能障碍的新疗法

• 批准号: 20K17940
• 负责人: 秋葉 ちひろ
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17940/
• 关键词: LRG; モデルマウス; 記憶; 海馬; モデル作製; LRG発現; タモキシフェン; 糖蛋白LRG; 慢性炎症; 加齢; 認知機能; 遺伝子組み換えモデルマウス

前年度までに、作製した組織特異的LRG過剰発現遺伝子組み換えマウス（糖蛋白LRGの過剰発現を、後天的かつアストロサイト特異的に誘導することにより、ヒトの生理的な加齢に近似させた病態モデルマウス）を用いた。同モデルマウスにタモキシフェンを腹腔内投与することにより、成熟アストロサイトに特異的なLRGの過剰発現を後天的に誘導した。タモキシフェン投与量を検討し、200 mg/kg×5日間のタモキシフェン投与にて、頭蓋内のLRG発現量は、タモキシフェン非投与群と比較し皮質で6.0倍・海馬で20.3倍となることを確認した。体重減少等の有害事象は認めなかった。海馬において優位に過剰発現が誘導される傾向は、研究責任者の先行研究と同様の結果であり、信頼性のあるものである（Akiba et al. Leucine-rich α2-glycoprotein overexpression in the brain contributes to memory impairment. Neurobiology of Aging. 2017）。続いて、LRG発現時期の異なるEarly-LRG群・Mid-LRG群・Late-LRG群を作製すべく、タモキシフェン投与時期をそれぞれ8・24・48週齢とするモデルマウス群を作製することを目指し、まずは8週齢と16週齢で、それぞれ投与後5日で脳検体のサンプリングを行った。その結果、各週齢ともタモキシフェン投与群でリン酸化CREB（cAMP-responsiveelement-bindingprotein）の発現が海馬歯状回に見られた。CREBは、長期記憶の形成に重要な転写因子のひとつで、リン酸化により活性化することが知られている。

去年，我们使用了一种组织特异性LRG过表达的基因工程小鼠（一种通过以后天性和星形胶质细胞特异性的方式诱导糖蛋白LRG过表达来近似人类生理衰老的病理状态模型小鼠）。 。对小鼠模型腹腔注射他莫昔芬可诱导成熟星形胶质细胞特异的 LRG 过度表达。我们研究了他莫昔芬的剂量并证实，与非他莫昔芬组相比，200 mg/kg x 5天的他莫昔芬组颅内LRG表达水平在皮质中高出6.0倍，在海马中高出20.3倍。没有观察到体重减轻等不良事件。主要在海马体中诱导过度表达的趋势与该研究主任之前的研究相似，并且是可靠的（Akiba et al. Leucine-rich α2-grind overexpressing in the Brain Causes for Memory Damage. Neurobiology of Aging. 2017）。接下来，为了创建具有不同LRG表达时间的早期LRG、中期LRG和晚期LRG组，我们旨在创建分别在8周龄、24周龄和48周龄时施用他莫昔芬的模型小鼠组。分别在 8 周龄和 16 周龄、给药后 5 天时首次采集脑标本。结果，在各年龄的他莫昔芬治疗组中，在海马齿状回中观察到磷酸化CREB(cAMP反应元件结合蛋白)的表达。 CREB ​​是长期记忆形成的重要转录因子之一，已知可通过磷酸化激活。