心筋線維化の評価・治療のための糖鎖マーカー開発を目指したグライコプロテオミクス

糖蛋白组学旨在开发用于评估和治疗心肌纤维化的聚糖标记物

基本信息

批准号：
20K17136
负责人：
岡谷千晶
金额：
$ 2.66万
依托单位：
National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

多くの心疾患でみられ、心不全をもたらす心筋線維化の評価及び治療のためのバイオマーカーが求められている。そこで本研究では、心筋線維化に対するバイオマーカーの開発を目指して、心筋線維化を担う細胞ではどのような糖タンパク質にどのような糖鎖修飾変化が生じるかを明らかにする。本研究からは、「線維をつくる活性」を評価するマーカーが得られるだけでなく、心筋線維化の分子メカニズム解明への重要な基礎情報が得られると期待できる。昨年度までに、心筋線維化モデル細胞のライセートおよび培養上清の比較糖鎖プロファイル解析を行ない、線維化刺激に伴いシグナル増加したレクチンを５種同定できた。そこで本年度は、線維化に伴い当該レクチンに結合する糖タンパク質が増加するかを検討した。レクチンブロット解析およびレクチン捕集実験により、レクチン２種について線維化刺激に伴う結合糖タンパク質の増加を確認できた。また、共同研究機関より提供された拡張型心筋症患者の心臓病理組織標本について、５種レクチンの染色が線維化領域に特異的であるかを評価した。アザン染色標本との比較の結果、レクチン３種が線維化領域に選択的な染色を示し、うち１種はN型糖鎖への結合によることが分かり、市販ヒト心臓組織標本を用いた検討結果を再現できた。以上の検討から、線維化関連糖タンパク質の網羅的同定のためのグライコプロテオーム解析に使用するレクチンを絞り込むことができた。

存在生物标志物用于评估和治疗心肌纤维化，这在许多心脏病中都可以看到，导致心力衰竭。因此，在这项研究中，为了开发用于心肌纤维化的生物标志物，我们将澄清负责心肌纤维化的细胞中发生的糖基化变化。预计这项研究不仅提供评估“纤维形成活性”的标记，而且还提供了阐明心肌纤维化的分子机制的重要基本信息。到去年，对裂解物和心肌纤维化模型细胞的裂解物和培养上清液进行了比较的聚糖谱分析，并且五种凝集素能够鉴定具有纤维化刺激的信号。因此，今年我们研究了与凝集素结合的糖蛋白数量是否随纤维化的增加。凝集素印迹分析和凝集素收集实验证实，与两种凝集素的纤维化刺激相关的结合糖蛋白增加。此外，我们评估了五种凝集素的染色是否特定于联合研究所提供的扩张心肌病患者心脏病理标本的纤维化区域。与Azan染色标本的比较表明，三种类型的凝集素对纤维化区域表现出选择性染色，其中一种导致与N型聚糖结合，并且复制了使用市售的人心脏组织标本的检查结果。从上面的研究中，我们能够缩小用于糖蛋白质组学分析的凝集素，以全面鉴定与纤维化相关的糖蛋白。

项目成果

期刊论文数量（26）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

心筋線維化における糖鎖変化

心肌纤维化中的聚糖变化

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
BIO CLINICA
影响因子：
0
作者：
福村真優;酒井宏;中川義久;藤居祐介;小澤友哉.;加藤　勝洋;岡谷千晶
通讯作者：
岡谷千晶

医療応用に向けた糖タンパク質の解析技術の開発

医学应用糖蛋白分析技术的开发

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takeshi Okada;Masahiro Koseki;Makoto Nishida;Takashi Omatsu;Katsunao Tanaka;Hiroyasu Inui;Jiuyang Chang;Kotaro Kanno;Ayami Saga;Tohru Ohama;Mitsuaki Ishihara;Takeshi Kujiraoka;Hiroaki Hattori;Daisaku Masuda;Shizuya Yamashita;Yasushi Sakata;岡谷千晶
通讯作者：
岡谷千晶

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