プロトンポンプ阻害剤服用時に歯周病原細菌が腸内細菌叢へ及ぼす影響

服用质子泵抑制剂时牙周病原菌对肠道菌群的影响

基本信息

批准号：
21K09893
负责人：
平井公人
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

【目的】本研究では、PPIの服用により胃酸の殺菌作用が低下した状態で、歯周病原細菌であるPorphyromonas. gingivalis（Pg）が腸内細菌叢へ与える影響を検討することを目的とした。そこでまず、PPI服用時に大量のPgを飲み込むことが腸内細菌叢に及ぼす影響を、マウスモデルにおいて組織学的及び免疫学的に検討した。【材料・方法】マウス（C57BL/6J，雄性，7週齢）にPPI（15 mg/Kg）を毎日5週間経口投与した（陰性対照はPBS）。投与開始1週間後からPg W83株（1×10^7 CFUあるいは1×10^8 CFU）を週3回経口投与した。5週間後に屠殺し、胃、大腸、盲腸を摘出した。そして、胃の内容物のpH測定、大腸組織のヘマトキシリン・エオジン染色、腸管組織中の炎症性細胞数のフローサイトメトリー解析を行った。さらに、盲腸内容物中の細菌叢解析を16S rRNAメタゲノム解析を行い、総細菌数に占めるPg数の定量はreal-time PCR法で行った。【結果】PPI投与群では胃内のpHは上昇していた。腸管上皮破壊と浸潤した炎症性細胞（好中球とマクロファージ）の数は、有意差はなかったが、PPI＋Pg群で増加傾向にあった。しかし、PPI＋Pg群の盲腸内ではPPI非投与群よりもPgの割合が上昇しており（1×10^7 CFU群で7.5倍，1×10^8 CFU群で13倍）、Pg 1×10^8 CFU群では有意に上昇していた。PPIによる胃酸の減少、pHの上昇は腸内へ口腔細菌が１０倍程度流入しやすいことが明らかとなった。また腸内細菌叢解析から，PBS＋Pg（1×10^8 CFU）群とPPI±Pg群で細菌叢のβ多様性が有意に変化しており、歯周病患者のPPIの長期服用は腸内細菌叢へ大きく影響を与えることが示唆された。

[目的]本研究旨在探讨服用质子泵抑制剂（PPIs）降低胃酸杀菌作用时，牙周病原菌牙龈卟啉单胞菌（Pg）对肠道菌群的影响。首先，我们在小鼠模型中通过组织学和免疫学研究了服用 PPI 时吞咽大量 Pg 对肠道菌群的影响。 [材料/方法] 小鼠（C57BL/6J，雄性，7周龄）每天口服PPI（15 mg/Kg），持续5周（PBS用作阴性对照）。开始给药1周后，每周口服3次Pg W83菌株（1 x 10^7 CFU或1 x 10^8 CFU）。 5周后，处死动物并切除胃、大肠和盲肠。然后，我们测量了胃内容物的pH值，用苏木精和伊红对大肠组织进行染色，并使用流式细胞术分析了肠组织中炎症细胞的数量。此外，进行16S rRNA宏基因组分析以分析盲肠内容物中的细菌菌群，并使用实时PCR对细菌总数中的Pg数量进行定量。 [结果] PPI给药组胃内pH值升高。肠上皮破坏和浸润炎症细胞（中性粒细胞和巨噬细胞）数量无显着差异，但PPI+Pg组有增加趋势。但PPI+Pg组盲肠中Pg的比例高于非PPI组（1×10^7CFU组的7.5倍，1×10^8CFU组的13倍），且Pg 1 × 10 ^8 CFU组显着增加。很明显，质子泵抑制剂引起的胃酸下降和 pH 值上升，使口腔细菌进入肠道的可能性增加了约 10 倍。此外，肠道微生物群分析显示，PBS+Pg（1×10^8CFU）组与PPI±Pg组之间微生物群的β多样性发生显着变化，且牙周病患者长期使用PPI有人认为这种效应极大地影响了细菌菌群。