歯原性間葉系幹細胞誘導因子の同定と歯の再生への応用

牙源性间充质干细胞诱导因子的鉴定及其在牙齿再生中的应用

基本信息

批准号：
20K09920
负责人：
和田裕子
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K09920/
关键词：
歯の再生器官形成上皮間葉相互作用歯再生間葉系幹細胞

项目摘要

歯胚発生過程の上皮間葉相互作用における上皮系幹細胞と間葉系幹細胞に重要な特異的因子を同定し、上皮間葉相互作用や歯の形態形成にどのように関わっているかを明らかにする目的で研究を行っている。これまでに微量RNA-seq解析により、胎生18日齢（E18）マウス臼歯歯胚における上皮と歯乳頭および歯小嚢に高発現する遺伝子群をそれぞれ検出し、歯乳頭に有意に高発現を認めるFactor Xと歯小嚢に有意に高発現を認める遺伝子群Yの解析を進めている。本年度は、マウス歯胚発生過程における帽状期、鐘状期前期、鐘状期後期、歯冠形成期および歯根形成期におけるFactor Xの発現について検討したところ、免疫組織学的に胎生期には歯乳頭の血管内皮細胞に強く発現を認め、生後の歯胚では象牙芽細胞と歯髄の血管内皮細胞に発現を認めた。マウス歯髄間葉細胞株mDPを用いてFactor XのsiRNAを行ったところ、骨芽細胞や象牙芽細胞の分化に関わる因子であるRunx2の発現が有意に抑制された。これらの結果より、Factor Xが歯の形態形成および象牙芽細胞の分化に関わる可能性が示唆された。歯小嚢に有意に高発現を認める遺伝子群Yについても、同様に発現解析を進め、胎生期に歯根膜に特異的に発現していた因子Y1とY2は、生後の歯胚で歯根膜だけでなく歯髄や象牙芽細胞にも発現を認めた。また、E18歯胚の歯小嚢細胞株の樹立に成功し、in vitro 実験に用いたところ、両因子の発現を認めた。さらに、E14歯胚の間葉細胞株の樹立にも成功し、両細胞株を用いて石灰化誘導実験を試みた。以上より、遺伝子群Yにおいても歯の形態形成に重要な因子である可能性が示唆された。

食用上皮干细胞和特定因素对于牙道植物过程中可互换的干细胞很重要，阐明了它们如何参与互连和牙齿的形成。迄今为止，少量的RNA-seq分析已检测到小鼠18天（E18）小鼠砂浆的牙齿囊的上皮，牙齿和牙齿，并显着识别出牙齿上的高表达。基因Y组Y组正在继续识别因子X和牙齿囊中的高表达。在这个财政年度，帽子上的因子X的表达，早期钟形期，钟形形成期的后半部分，冠状形成周期和小鼠胚胎发育过程中的根形成阶段，免疫系统在体现中在牙齿的血管内皮细胞中，强烈考虑了牙齿的牙齿胚胎，并在牙髓中识别出内皮细胞。当使用小鼠牙科叶细胞共享MDP进行因子X的siRNA时，Runx2的表达与成骨细胞和象牙的分化有关的因子被显着抑制。这些结果表明，因子X可能与牙齿和象牙胆的形成有关。在Y基因Y中显着识别牙齿囊中的高表达，Y1和Y2的因子在牙周动力周期中通常表达，仅在周期性周期中进行了周期性表达在果肉和象牙细胞中。此外，成功建立了E18牙齿胚胎-embryos，并且在体外实验中使用时，都会观察到这两个因素的表达。此外，成功建立了E14牙齿胚胎的细胞间细胞，并尝试使用两个细胞尝试钙化诱导实验。从以上提出，遗传组y可能是牙齿形式的重要因素。