Establishment of methods of prevention for anisakis allergy by reducing allergenicity

通过降低过敏原性来建立异尖线虫过敏的预防方法

• 批准号: 20K08694
• 负责人: 猪又 直子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Showa University (2021-2022)Yokohama City University (2020)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K08694/
• 关键词: アニサキス; アレルゲン; 低アレルゲン化; アレルギー; アナフィラキシー; 予防; アニサキスアレルギー; 食物アレルギー; 魚アレルギー

本年度は、アニサキスを安定的に採取することに成功し、順調に研究を進めることできた。主な研究成果は以下の通りである。①アニサキスの経時的な生存率の追跡：太平洋側沿岸で漁獲され、冷蔵保存されたマサバからアニサキス第3期幼虫をブラックライト照射下で採取し、アニサキス虫体の形態を顕微鏡で確認した。その後、保管期間による生存状況の推移を観察した。飼育液中で4℃冷蔵保管したところ、3か月以上生存することが判明した。飼育液の温度が約18℃に上昇すると活動を開始し、温度の変化で活動性に変化がみられた。②アニサキス抗原抽出液の作成と解析：アニサキス虫体を溶液と混合し、ソニケーターにより攪拌し、遠心分離後、上清を採取し粗抗原液とした。抗原液を用い、ポリアクリルアミドゲルを利用した電気泳動したところ、分子量１～200kDa以上の幅広い範囲に多数のバンドを検出した。以後、本抽出液を粗抗原液として使用することとした。③加工処理後のアレルゲン性の解析：処理方法には、加熱、加圧、冷凍、酵素処理、浸水処理などがあり、低アレルゲン化には、変性、分解、除去による方法がある。昨年度から引き続き、変性による方法をとり、加熱と冷凍、さらに加圧を検討することとした。生きた虫体を採取し、②の方法により粗抗原液を作成し、加熱は20～140℃まで、加圧は常圧と加圧、冷凍は-20～-80℃まで加工処理を行った。現在、種々の加工処理を施した抗原液を抗原として、患者全血を用いた好塩基球活性化試験CD203c活性化解析を施行している。好塩基球活性化率を測定し、加工によるアレルゲン性の低下を解析している。ex vivoの好塩基球活性化試験による解析結果を踏まえ、その他の手法を用い、アレルゲン性の確認を行う予定である。

今年，我们能够成功地稳定地收集Anisakis，并成功地进行了研究。主要的研究结果如下：1。随着时间的流逝，追踪亚萨基人的生存率：Anisakis 3阶段幼虫是从捕获在太平洋沿岸的冷藏鲭鱼中收集的，并在黑光下以冷冻状态存储在黑光下，并在显微镜下证实了Anisakis蠕虫的形态。之后，我们观察到生存状态的变化，具体取决于存储期。当在繁殖溶液中储存4°C时，发现它可以存活超过三个月。当繁殖液的温度升至约18°C时，它开始变得活跃，并且由于温度的变化而观察到活动的变化。 2. Anisakis抗原提取物的制备和分析：将Anisakis蠕虫体与溶液混合，用超声搅拌，离心，然后收集上清液以形成粗糙的抗原溶液。当使用抗原溶液使用聚丙烯酰胺凝胶进行电泳时，在1至200 kDa或更多的分子量范围内检测到大量带。从现在开始，提取物被用作粗抗原溶液。 3）处理后的过敏性分析：治疗方法包括加热，加压，冻结，酶处理和洪水处理以及可以通过变性，分解和去除来实现过敏性。从去年开始，我们决定继续使用变性方法，加热，冷冻和加压。收集了活体昆虫体，并使用该方法②制备了粗抗原溶液，并在正常压力下进行加热并加压，冻结从-20到-80°C进行处理。当前，使用全患者血液，使用将各种加工作为抗原进行各种加工处理的抗原溶液进行CD203C激活分析。测量嗜碱性粒细胞激活率，并分析由于加工而导致的过敏性降低。基于离体嗜碱性激活测试的分析结果，我们计划使用其他方法来确认过敏性。

项目成果

ペットと食物アレルギー

宠物和食物过敏

• 发表时间: 2022
• 作者: 斎藤理佐;種子島幸祐;原 孝彦;猪又直子
• 通讯作者: 猪又直子

食物によるアレルギー性蕁麻疹の診断と治療

食物过敏性荨麻疹的诊治

• 发表时间: 2022
• 作者: Tsujihana Kojiro;Tanegashima Kosuke;Santo Yasuko;Yamada Hiroyuki;Akazawa Sota;Nakao Ryuta;Tominaga Keiko;Saito Risa;Nishito Yasumasa;Hata Ryu-Ichiro;Nakamura Tomonori;Murai Iori;Kono Yuka;Sugawa Maho;Tanioka Miki;Egawa Gyohei;Doi Masao;Isa Tadashi;Kabashi;猪又直子
• 通讯作者: 猪又直子

アレルギー診断検査の実際

过敏诊断测试的实际操作

• 发表时间: 2020
• 作者: Kawakami Toru;Nakazawa Hideyuki;Ishida Fumihiro;猪又直子
• 通讯作者: 猪又直子

増えている大人の消化管アレルギー 109巻7号（2021年7月）

成人胃肠道过敏日益增加，第 109 期，第 7 期（2021 年 7 月）

• 发表时间: 2021
• 期刊: 診断と治療
• 作者: K. Nakagawa*;S. Minakawa;and D. Sawamura;猪又直子
• 通讯作者: 猪又直子

Mast cell-mediator induced angioedema, Update

肥大细胞介导的血管性水肿，更新

• 发表时间: 2021
• 作者: Tsuji Noriaki;Hosokawa Kohei;Urushihara Ryota;Tanabe Mikoto;Katagiri Takamasa;Ozawa Tatsuhiko;Takamatsu Hiroyuki;Ishiyama Ken;Yamazaki Hirohito;Kishi Hiroyuki;Ogawa Seishi;Nakao Shinji;Naoko Inomata
• 通讯作者: Naoko Inomata