冷痛覚過敏の治療ターゲットとして展開する炎症時TRPA1チャネルの動態解析

炎症过程中TRPA1通道作为冷痛觉过敏治疗靶点的动态分析

• 批准号: 18K17039
• 负责人: 田澤 建人
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-11-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K17039/
• 关键词: TRPチャネル; 歯髄細胞; LPS; NO; P38; 石灰化; 歯髄; TRPA1; Lyve1; マクロファージ; ヒト歯髄細胞; 象牙芽細胞; 歯髄幹細胞; 疼痛

歯髄細胞におけるTRPA1の生理機能解析および発現誘導メカニズムの解析を行った。LPSにより誘導されるTRPA1発現は、NFkB阻害剤によって抑制されなかったが、一酸化窒素ドナーであるNOR5刺激によりTRPA1発現が増加したことから、LPS刺激により誘導された一酸化窒素(NO)がTRPA1発現誘導に関与することを明らかにした。NOの下流シグナル解析では、NO刺激によりp38MAPKシグナルが活性化することを明らかにした。p38MAPK阻害薬であるSB203580を添加後LPS刺激を行ったところ、LPS刺激により誘導されるTRPA1発現は抑制された。以上により、LPS刺激により誘導されるTRPA1発現にはNOにより活性化されるp38MAPKが関与していることが示唆された。TRPA1機能解析においては、TRPA1作動薬により細胞内カルシウムイオン濃度が上昇することを確認し、またTRPA1作動薬により象牙芽細胞関連遺伝子の発現上昇および石灰化結節形成の促進を認めたことからTRPA1は象牙芽細胞への分化および石灰化を亢進することが示唆された。以上の結果はThe American Journal of Pathologyに掲載された。また、炎症歯髄におけるLyve1陽性マクロファージの動態および生物学的役割についても評価した。歯髄におけるLyve1陽性マクロファージはM2-likeの組織常在性マクロファージであり、窩洞形成により炎症により一時的にその数が減少するものの、組織のリモデリングに伴って、定常時レベルまで増加することを明らかにした。さらにLyve1を強制発現されたRAW細胞においては血管新生関連遺伝子の発現が増加し、VEGFAタンパクをコントロールRAW細胞よりも有意に分泌しHUVEC細胞の管腔形成を促進した。これらの結果はScientific Reportsに掲載された。

进行了TRPA1的生理分析和纸浆细胞中TRPA1的诱导机制。 LPS诱导的TRPA1表达并未被NFKB抑制剂抑制，但是NOR5刺激（氮供体）增加了TRPA1的表达，因此TRPA1由LPS刺激诱导。 NO的下游信号分析表明，NO刺激激活了p38mapk信号。添加SB203580（P38MAPK抑制剂）后，抑制了LPS刺激，并抑制了LPS刺激诱导的TRPA1表达。结果，有人提出，LPS刺激诱导的TRPA1表达与p38mapk有关，p38mapk被NO激活。在TRPA1功能分析中，TRPA1已证实，由于TRPA1激活药物，细胞内钙浓度增加，TRPA1参与者显示出象牙和intectect晶晶状体细胞表达的上升以及钙化节点形成的促进。建议将分化和钙化增加到象牙芽中。上述结果发表在《美国病理杂志》上。他还评估了Lyve1阳性巨噬细胞在炎症性纸浆中的动力学和生物学作用。果肉中的裂解1阳性巨噬细胞是M2样的组织工业巨噬细胞，这表明由于腔的形成，由于炎症而暂时减少了数量，但随着组织的重塑，它会增加到水平。此外，在被迫表达lyve1的原细胞中，血管相关基因的表达增加，而VEGFA蛋白比对照原始细胞显着分泌，以促进HUVEC细胞的管形成。这些结果发表在科学报告中。

项目成果

LPS刺激ヒト歯髄細胞におけるTRPA1の発現はNO/p38 MAPKシグナルにより誘導される

NO/p38 MAPK 信号诱导 LPS 刺激的人牙髓细胞中 TRPA1 表达

• 发表时间: 2018
• 作者: 田澤 建人;川島 伸之;倉本 将司, 奈良 圭介;野田 園子;藤井 真由子;橋本 健太郎;興地 隆史
• 通讯作者: 興地 隆史

Transient Receptor Potential Ankyrin 1 Is Up-Regulated in Response to Lipopolysaccharide via P38/Mitogen-Activated Protein Kinase in Dental Pulp Cells and Promotes Mineralization

牙髓细胞中瞬时受体电位锚蛋白 1 通过 P38/丝裂原激活蛋白激酶响应脂多糖而上调并促进矿化

• DOI: 10.1016/j.ajpath.2020.08.016
• 发表时间: 2020
• 期刊: The American journal of pathology
• 作者: Tazawa K;Kawashima N;Kuramoto M;Noda S;Fujii M;Nara K;Hashimoto K;Okiji T
• 通讯作者: Okiji T

2.TRPA1 is upregulated in response to LPS via P38/MAPK and promotes mineralization in dental pulp cells.

2.TRPA1 通过 P38/MAPK 响应 LPS 上调，并促进牙髓细胞矿化。

• 发表时间: 2019
• 作者: 田澤建人;川島伸之;興地隆史
• 通讯作者: 興地隆史

1.TRPA1 is upregulated in response to LPS via p38/MAPK and promotes mineralization in dental pulp cells.

1.TRPA1 通过 p38/MAPK 响应 LPS 上调，并促进牙髓细胞矿化。

• 发表时间: 2020
• 作者: Tazawa Kento;Kawashima Nobuyuki;Kuramoto Masashi;Nara Keisuke;Fujii Mayuko;Noda Sonoko;Hashimoto Kentaro;Okiji Takashi.
• 通讯作者: Okiji Takashi.

LYVE-1-expressing macrophages co-express CD163 in rat normal dental pulp tissue

表达LYVE-1的巨噬细胞在大鼠正常牙髓组织中共表达CD163

• DOI: 10.20817/jeajournal.40.1_7
• 发表时间: 2019
• 期刊: The Journal of Japan Endodontic Association
• 作者: 南翔太;西田圭一郎;越川陽介;加藤正樹;木下利彦;田澤建人，川島伸之，草野雅彦，池田英治，興地隆
• 通讯作者: 田澤建人，川島伸之，草野雅彦，池田英治，興地隆