Elucidation of the mechanism of V1a receptor-induced uterine contraction via receptor coordination and derivation of therapeutic targets for preterm birth

通过受体协调阐明 V1a 受体诱导子宫收缩的机制并推导早产治疗靶点

基本信息

批准号：
21K09477
负责人：
土屋裕義
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

今回の研究では分娩機能解析として恒常的な全身性の遺伝子欠損マウスではなく、アデノ随伴ウイルス（AAV）感染とRNAi技術を組み合わせて後天的な遺伝子欠損を起こしたマウスを用いて、分娩機能を観察しようとしている。前年度は、最も効率的な遺伝子配列を絞り込み、効率的なRNAiを行うためのプラスミド作成を行った。本年度は実際にこのプラスミドを組み込む先のAAVの種類の選定を行った。AAVは12種類のセロタイプが知られ、その中のAAV2が最も頻用されている。しかしながら、これまでの解析からAAV2は胎仔毒性が危惧されている。そこで本研究では別のセロタイプ(AAV5, AAV10)での遺伝子導入を計画し研究を進めている。使用したセロタイプの十分な情報が存在しないため、GFP導入AAVを野生型マウスに感染させることにより、感染後のウイルスの分布や有害作用について詳細な解析を行っている。我々の研究からバソプレッシンV1a受容体は様々な生殖器系の組織に発現し、その機能を制御していることが分かっている。この生殖機能制御はメスにかかわらず、オスでも同様である。これまでの解析から、バソプレッシンV1a受容体がオスの精巣上体の機能制御にかかわることが明らかとなり、今回学術誌に発表した。バソプレッシンV1a受容体欠損マウスは精子の運動機能が野生型と異なるが、その理由が精巣上体内でのイオン(プロトン)の制御に起因するものであると考えられた。生殖組織とpHの関係は古くから知られており、今回の結果はその細胞周囲の環境制御にバソプレッシンV1a受容体とトランスポーターであるV-ATPaseの相互作用が重要であることを示している。同一細胞に発現する他の機能タンパク質とバソプレッシンV1a受容体のこの協調作用は雌性生殖機能にも重要なヒントをもたらすと考えている。

在这项研究中，我们试图使用已经通过腺体相关病毒（AAV）与RNAi技术相结合的小鼠来观察劳动功能，而不是构成性的全身基因缺乏小鼠。在上一年，我们缩小了最有效的基因序列，并创建了质粒以执行有效的RNAi。今年，我们实际上选择了将其合并到的AAV类型。 AAV有12种已知的血清型，而AAV2是最常用的。但是，先前的分析表明AAV2可能是胎儿有毒。因此，这项研究是在其他血清型中计划和进行研究（AAV5，AAV10）。由于没有足够的有关所使用的血清型的信息，因此我们通过用GFP引入的AAV感染了野生型小鼠，对感染病毒和不良反应的分布进行了详细分析。我们的研究表明，加压素V1A受体在生殖系统的各种组织中表达并调节其功能。无论女性如何，男性的生殖控制都是相同的。先前的分析表明，加压素V1A受体参与了男性附睾的功能调节，本文发表在一本学术期刊上。血管加压素V1A受体缺陷型小鼠在野生型的精子中具有不同的运动功能，因此人们认为这是由于附子症中离子（质子）的调节所致。长期以来，生殖组织与pH之间的关系已知，目前的结果表明，加压素V1A受体与转运蛋白V-ATPase之间的相互作用对于控制周围的细胞环境很重要。我们认为，加压素V1A受体与同一细胞中表达的其他功能蛋白的协调为女性生殖功能提供了重要的提示。