血管内皮細胞機能の補完は腸管虚血の予後を改善するか：新規マウス虚血モデルでの検討

血管内皮细胞功能的补充能否改善肠缺血的预后：新的小鼠缺血模型的检查

• 批准号: 21K09023
• 负责人: 林 美鈴
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: University of the Ryukyus
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09023/
• 关键词: 腸管虚血再灌流障害; 一酸化窒素; 糖尿病; 血管内皮; 腸管虚血

マウス腸管虚血再灌流障害を野生型及び肥満・糖尿病型マウスにおいて作成し、肥満・糖尿病型マウスが術後48時間の死亡率75%をきたす虚血時間での虚血再灌流をおこなった。再灌流後４時間で採取した小腸組織を用いて組織学的評価をおこなった。小腸粘膜スコアは腸管虚血群とsham手術群の間で有意差を認めたが、肥満・糖尿病型マウス及び野生型マウスの比較では、小腸粘膜損傷スコアは、有意差を認めなかった。小腸組織および、腸管虚血再灌流障害の重症度に関連するとされる肺障害・肝障害について、分子生物学的検討（ウエスタンブロット法、PCR法）を実施した。腸管血流量低下に関係すると思われるNO合成酵素や炎症性サイトカインの発現量をターゲットとして小腸組織に関して検討を行ったが、有意な差を認めなかった。虚血臓器にある小腸は、再灌流４時間後の組織学的・分子生物学的検討のいずれにおいても、肥満・糖尿病型と野生型の間で差は見られない、という結果を得た。遠隔臓器である肺・肝について先行研究の結果を参考に炎症性サイトカインの発現量の差を検討したが、有意な差を認めなかった。いずれの組織においてもサンプル採取時間が適切でない可能性があり、また、小腸組織に関しては、障害粘膜上皮が管腔内に剥脱し採取サンプル内に残存していない可能性も考えられた。サンプル採取時期・手法の変更を検討中である。前年度、亜硝酸ナトリウム水溶液飲水による生存率改善をN=6で検討したが、腸管虚血再灌流障害について検討した先行研究ではN=20-30に設定して検討したものが多い。死亡率が低下する傾向を示した亜硝酸ナトリウム水溶液濃度についてマウスのNを増やし再検討したが、再度、有意差を認めなかった。

小鼠肠道缺血 - 再灌注损伤是在野生型和肥胖糖尿病小鼠中产生的，肥胖的糖尿病小鼠在缺血时期受到缺血 - 再灌注，术后75％的死亡率为48小时。再灌注后4小时收集的小肠组织进行组织学评估。尽管小肠缺血组和假手术组之间的小肠粘膜评分存在显着差异，但肥胖/糖尿病和野生型小鼠之间的差异，但小肠粘膜损伤评分没有显着差异。分子生物学研究（蛋白质印迹，PCR）在小肠道组织，肺和肝损伤上进行，这被认为与肠道缺血再灌注损伤的严重程度有关。我们使用NO合酶和炎性细胞因子的表达水平研究了小肠道组织，这些水平被认为与降低肠血流有关，但没有发现显着差异。结果表明，在再灌注4小时后，在缺血性器官的小肠中，在缺血器官的小肠中没有发现肥胖/糖尿病和野生型类型之间的差异。我们使用先前研究的结果研究了肺和肝脏中炎症的炎症细胞因子的表达水平的差异，但没有发现显着差异。两组的样品收集时间也可能是不合适的，并且在小肠组织中，粘膜上皮受损可能会被剥落到管腔中，而不会保留在样品中。我们目前正在考虑更改示例收集时间和方法。在上一年，研究了n = 6，以通过饮用亚硝酸钠水来提高存活率，但以前的许多研究检查了肠缺血 - 重新灌注损伤的n = 20-30。通过增加小鼠的N来重新检查氮水溶液的浓度，显示出降低死亡率的趋势，但没有再次观察到显着差异。