The molecular mechanism of hepatocellular carcinoma associated fibroblast oriented exosome miRNA

肝细胞癌相关成纤维细胞定向外泌体miRNA的分子机制

基本信息

批准号：
21K08718
负责人：
池上徹
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08718/
关键词：
肝細胞癌エクソソーム miRNA 癌微小環境

项目摘要

進行肝細胞癌における進展転移における癌微小環境の重要な構成要素である癌関連線維芽細胞（CAF）に注目した。CAFの上清あるいは分離したエクソソームを肝癌細胞株であるHuh7に添加を行ったところ、CAFから分離したエクソソームの添加が、非癌部肝組織から抽出したNFに比し、あきらかに肝癌細胞株の運動性すなわち浸潤進展性を高めていることをMigration assay、Invasion assayにて確認できた。正常肝細胞、星細胞、正常線維芽細胞およびCAFにてmiRNA-150の発現量を定量的RT-PCRを行ったところ、CAFおよびCAF由来エクソソームでmiRNA-150の発現低下を認めた。さらにCAF関連エクソソームと共培養した肝癌細胞株Huh7およびHep3BではmiRNA-150の高発現をみとめた。またSYTO0染色されたエクソソームと24時間共培養したHuH7では明らかな陽性蛍光染色をみとめ、HuH7とHep3B細胞の浸潤転移活性はmiR-150由来含有エクソソームのトランスフェクションにより阻害されることが明らかとなった。臨床検体においては、82症例の肝細胞癌患者において血清miRNA-150発現量をRTPCRにて定量したところ組織学的に線維化が進行している症例においてmiRNA-150の発現が低下していることが明らかとなった（62.1% vs. 35.9%, p=0.02）。miRNA-150低値群では肝細胞癌結節被膜浸潤がより低度であり（72% vs. 88%, p=0.03）、recurrence free survival rateがより低下していた（p<0.01）。多変量解析では、miRNA-150低発現、男性、低アルブミン、高AFP値、肝内転移が有意な予後不良因子であった。

我们专注于癌症相关的成纤维细胞（CAF），这是晚期肝细胞癌晚期转移中癌症微环境的关键组成部分。当将CAF的上清液或孤立的外泌体添加到Huh7的肝癌细胞系HU7中时，通过迁移和入侵测定法证实，与非癌细胞细胞系的侵入性相比，从CAF中分离出的外泌体显然增加了运动性，即，与非癌性癌细胞的侵入性进展相比。在正常的肝细胞，星状细胞，正常成纤维细胞和CAF的miRNA-150的表达水平上进行定量RT-PCR，并显示出CAF和CAF衍生的外生体中miRNA-150的表达降低。此外，在肝癌细胞系HUH7中观察到了miRNA-150的高表达，并与CAF相关外泌体共培养HEP3B。此外，在与SYTO0染色的外泌体共培养的HUH7中观察到明显的阳性荧光染色24小时，并且发现Huh7和Hep3B细胞的侵入性和转移活性被miR-150含有miR-150的外泌体的转染抑制。在临床标本中，通过RTPCR在82例肝细胞癌患者中通过RTPCR定量血清miRNA-150表达水平，并且发现在纤维化的组织学进展的情况下，miRNA-150表达降低（62.1％vs. 35.9％，35.9％，p = 0.02）。在低miRNA-150组中，肝细胞癌淋巴结胶囊浸润较低（72％对88％，p = 0.03）和较低的无复发存活率（p <0.01）。在多变量分析中，miRNA-150表达低，男性，低白蛋白，高AFP水平和肝内转移是明显不良的预后因素。

项目成果

期刊论文数量（21）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

パラダイムシフトを迎える肝癌に対する外科治療

肝癌的手术治疗正在经历范式转变

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
齋藤心;春田英律;千葉蒔七;千葉小夜;小池瑛;細谷好則;倉科憲太郎;岡田健太;北山丈二,佐田尚宏;池上　徹
通讯作者：
池上　徹

トロンボモジュリンの抗炎症作用による膵癌進展抑制効果

通过血栓调节蛋白的抗炎作用抑制胰腺癌进展的效果

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
白井祥睦;後町武志;羽村凌雅;恒松雅;堀内尭;塩崎弘憲;坂本太郎;谷合智彦;柳垣充;春木孝一郎;安田淳吾;古川賢英;恩田真二;奥井紀光;鈴木文武;阿部恭平;宇和川匡;菅野宏;佐藤峻;池上徹
通讯作者：
池上徹

Evaluation of the Intention-to-Treat Benefit of Living Donation in Patients With Hepatocellular Carcinoma Awaiting a Liver Transplant

DOI：
10.1001/jamasurg.2021.3112
发表时间：
2021-07-14
期刊：
JAMA SURGERY
影响因子：
16.9
作者：
Lai, Quirino;Sapisochin, Gonzalo;Lerut, Jan Paul
通讯作者：
Lerut, Jan Paul

Clinical significance of cachexia index in patients with hepatocellular carcinoma after hepatic resection.

DOI：
10.1016/j.suronc.2022.101881
发表时间：
2022-11
期刊：
Surgical oncology
影响因子：
0
作者：
Munetoshi Akaoka;K. Haruki;T. Taniai;M. Yanagaki;Yosuke Igarashi;K. Furukawa;S. Onda;Masashi Tsunematsu;Yoshihiro Shirai;Norimitsu Okui;T. Gocho;Toru Ikegami
通讯作者：
Munetoshi Akaoka;K. Haruki;T. Taniai;M. Yanagaki;Yosuke Igarashi;K. Furukawa;S. Onda;Masashi Tsunematsu;Yoshihiro Shirai;Norimitsu Okui;T. Gocho;Toru Ikegami

新規がん遺伝子候補Solute carrier family12 member9(SLC12A9)の大腸がん進行における意義の解明

阐明新候选癌症基因溶质载体家族 12 成员 9 (SLC12A9) 在结直肠癌进展中的重要性