Development and application of an early detection method for postoperative recurrence of colorectal cancer using tears

泪液早期检测结直肠癌术后复发方法的开发与应用

基本信息

批准号：
21K08778
负责人：
松田武
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、Liquid biopsy による原発性大腸癌術後再発の早期検出法の開発を目的とし、患者検体の採取および解析手段として涙液由来エクソソーム検出法（TearExo 法) を用いる。本手法は①症例検体集積が簡便であり、迅速な前向き研究が実施可能、②エクソソームを確保するための抗体は選択可能で、病態・患者特異的に最適化したエクソソーム解析が可能、等の利点がある。転移臓器別抗体および患者個別抗体によるエクソソームを検出することで、個別検出を目指した次世代型精密医療の基盤構築を試みる。まず、大腸癌細胞株を用いたエクソソーム検出と確認を行う。採取されたエクソソームをmiRNA検出で確認する。大腸癌細胞株由来や大腸癌原発巣切除例組織（オルガノイド）培養液由来のエクソソームの単球系細胞への影響を検討する。この部分は超遠心とELISA 法で検証する。エクソソームと単球系細胞への影響を検討する。超遠心と ELISA 法で検証し、RNAシーケンスを行う。さらに、大腸癌原発巣切除例のエクソソーム検出と定量を行うために、術前後でTearExo 法の検証を行う。さらに、同系が確立されれば、大腸癌同時性肝転移症例、同時性肺転移症例に対するエクソソーム検出とエクソソームの解析を行う。術前後でTearExo 法でのエクソソーム検証を行う。さらに、原発性大腸癌切除例に対するエクソソーム検出例の集積と観察研究を行い、大規模前向き臨床研究へと進めたい。本研究の成果は、大腸癌の再発の早期検出のみならず、臓器指向性転移の検出方法が期待され、臓器別のフォローを重点的に行うことにより、早期発見と早期治療による治療性の向上を目指すものである。

在这项研究中，使用液体活检进行核颜色的结直肠癌手术后的早期检测方法的开发目的，并将Tearexo泪液衍生（Tearexo方法）用作患者样本和分析手段。该方法是（1）案例样本的积累很简单，可以进行快速的阳性研究，（2）选择外骨的抗体，并且可以使用外泌体分析，例如病理和患者的状况特定优化。通过通过转移或单个抗体检测抗体的外泌体，我们将尝试建立一个针对个体检测的下一代精度医疗基础。首先，使用结直肠癌细胞库存进行外新Nes检测和确认。通过miRNA检测检查收集的外泌体。检查源自结肠直肠癌细胞库存和结直肠癌巢穴（Organoids）培养溶液对单核细胞的外来体的影响。该部分通过Ultra -centrifugal和ELISA方法验证。检查对外泌体和单眼细胞的影响。通过超级疗法和ELISA验证，并执行RNA序列。此外，手术前后对Tearexo方法进行了验证，以执行结肠癌筑巢的断裂连接的外部检测和数量。此外，如果建立了同一机构，则检测到外泌体，并对结直肠癌相同的肝转移和同时肺部转移病例对病例进行外泌体分析。手术前后，通过Tearexo方法执行散热器验证。此外，我们想对原发性结直肠癌去除实例进行外泌体检测示例，并进行大规模的阳性临床研究。这项研究的结果预计不仅会发现结直肠癌的复发，还可以检测到器官或定向转移，并通过早期检测和早期治疗来通过重点介绍器官。