Clinical significance of oxidative stress-induced mitochondrial dysfunction in liver tissue of biliary atresia

氧化应激所致胆道闭锁肝组织线粒体功能障碍的临床意义

• 批准号: 21K08628
• 负责人: 岡崎 任晴
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08628/
• 关键词: 胆道閉鎖症; 自己肝生存; 肝内ミトコンドリア; ATP産生能; 酸化ストレス; 小児胆汁うっ滞疾患; 細胞内小器官; ミトコンドリア; ミトコンドリア機能; 肝線維症; ATP産生

本研究は、胆道閉鎖症患者および対照疾患患者の臨床肝検体を用いてミトコンドリア機能を軸に酸化ストレスの臨床意義を解明するものである。1)今年度も昨年度から引き続き、胆道閉鎖症肝組織におけるミトコンドリア機能・酸化ストレス因子と臨床パラメータの相関性を検討するため、胆道閉鎖症患者と胆道拡張症・他胆汁うっ滞疾患などのコントロール疾患症例から手術時・生検により肝組織を一部採取し、組織解析とmRNAの発現解析を進められるようにサンプルの準備を進めてきた。症例ごとに血液学的肝機能値・生命予後・自己肝生存などの臨床項目を調査した。2)過去検体も含めた組織免疫染色については、マトリックスマーカーのHsp60の発現分布を肝細胞内で定量化したところ、肝組織にダメージのない肝芽腫患者の正常肝組織や先天性胆道拡張症の肝組織と比して、胆道閉鎖症の肝組織内ではHsp60発現分布が低いこと、さらに胆道閉鎖症患者に限定しても肝移植となった予後不良な症例に比して、予後良好患者ではHsp60発現は高かった。すなわち、胆道閉鎖症の特に肝機能予後が不要な症例の手術時肝ではミトコンドリアのviabilityが損なわれていると考えられた。3)胆道閉鎖症特有にみられるミトコンドリア機能や酸化ストレス関連因子を網羅的に比較検討するためのバルクRNA-Seq解析を行った。非胆道閉鎖症肝のうち特に正常肝と比して、胆道閉鎖症肝ではミトコンドリアマトリックス関連分子群が大きく発現低下しているGO解析・pathway解析結果が得られた。また、解析結果をより強固なものとする準備として、胆道閉鎖症および対照症例肝組織からのmRNA抽出を継続した。

这项研究使用胆道闭锁患者和对照疾病的临床肝标本来阐明氧化应激的临床意义，重点是线粒体功能。 1）今年，随着我们从去年开始的继续，为了研究胆性闭锁处的线粒体功能与氧化应激因素与氧化应激因素与氧化应激因素与临床参数之间的相关性，我们一直在准备样品，以便从胆汁疾病和其他biariary biariary biary cheastia and colest and colest and choreSia和其他疾病的患者中收集肝组织的一部分。正在准备样品，以便可以进行组织分析和mRNA表达分析。每种情况下研究了血液学肝功能值，生命预后和自体肝存活等临床项目。 2）关于组织免疫染色，包括过去的样品，在肝细胞中定量基质标记物HSP60的表达分布，而HSP60表达在肝脏组织中与肝内肝组织正常组织相比，HSP60表达较低与预后不良的病例相比，肝移植不良的病例良好的患者的HSP60表达更高。换句话说，人们认为在手术时肝脏中的线粒体生存力受损，尤其是在不需要肝功能预后的情况下。 3）进行大量RNA-seq分析以全面比较胆道闭锁中发生的线粒体功能和与氧化应激相关因素。 GO和途径分析结果表明，与正常肝脏相比，胆道闭锁的线粒体基质相关分子显着降低，尤其是在非胆汁闭锁肝脏中。为了进一步加强分析结果，继续从胆道闭锁中肝组织提取mRNA和对照病例。