自己肝温存同所性部分肝移植と組織幹細胞移植併用による自己残肝再生促進効果

自体保肝原位部分肝移植与组织干细胞移植联合促进自体残余肝再生的效果

• 批准号: 21791256
• 负责人: 山之内 孝彰
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21791256/
• 关键词: 細胞移植; 肝移植; 多能性幹細胞; 肝再生

目的:自己肝温存同所性部分肝移植(auxiliary partial orthotopic liver transplantation:APOLT)モデルのラットに対して、自己脂肪組織から分離した多能性幹細胞を自己残肝に移植し、自己残肝の再生および機能回復を促す。上記実験に先立ち、同種成熟肝細胞移植の障害肝に対する置換効果を検討した。(方法) マーカーとしてレシピエントにDPPIV(-)、ドナーにDPPIV(+)ラットを用いた。レシピエントラットの肝前葉にX線50Gyを照射し障害を与え、再生刺激として肝右中葉(全肝の約20%)へ向かう門脈の枝を結紮した。その後、ドナーラットから、コラゲナーゼ還流法にて分離した成熟肝細胞を経門脈的に移植した。(結果) 移植8週後、摘出肝のDPPIV組織染色では、赤く染まるドナー由来肝細胞が著明に増殖し、レシピエント肝細胞の80%以上を置換していた。さらにドナー由来の肝細胞は、PAS染色ではゴリコーゲンが、免疫染色では糖新生関連酵素であるPCK-1、肝細胞間gap結合に特異的なコネキシン32が正常肝と同様に発現していることが確認された。(結語) 移植された成熟肝細胞は、レシピエントの障害肝において、増殖刺激の存在下にレシピエント肝細胞を置換するまでに著明な増殖を認めた。さらに、移植肝細胞は、正常肝細胞と同様にグリコーゲン貯蔵や糖新生酵素の発現を認め、正常のgap結合を構築しつつ増殖していることが明らかとなった。多能性幹細胞はin vitro、in vivoで肝細胞様細胞に分化することが知られている。APOLTモデルに対する多能性幹細胞移植により、自己残肝の再生促進や正常な機能回復を得られる可能性が示唆された。

目的：要从自体脂肪组织分离的多能干细胞中，在辅助部分原始肝移植（APOLT）模型的大鼠中，在大鼠的自我旅行肝脏中，从自体脂肪组织中分离出的多能干细胞，从自体脂肪组织进入自我遗漏的肝脏中，鼓励自我验证的肝脏，并鼓励自我恢复和自我效力。在上述实验之前，研究了同种异性成熟肝细胞移植对受损肝脏的替代作用。 （方法）将大鼠用作DPPIV（ - ）的标记和DPPIV（+）大鼠的供体。受体大鼠的前肝叶被X射线50 Gy照射以造成损伤，作为一种再生刺激，门静脉的分支朝向肝脏的右侧叶（约占总肝脏的约20％）。之后，从供体大鼠中移植了被胶原酶反流分离的成熟肝细胞。 （结果）植入八周后，切除的肝脏的DPPIV组织染色表明，红色染色的供体的肝细胞显着增殖，取代了80％以上的受体肝细胞。此外，已经证实，供体衍生的肝细胞在PAS染色，与葡萄酮相关的酶PCK-1和连接蛋白32中表达的Golicogen，特定于ePATOCATOCATOLULURALULUAN GAP结合，以与正常肝的同样方式表达。 （结论）移植成熟的肝细胞在受体受损的肝脏受损之前显示出显着的增殖，然后在存在增殖刺激的情况下被接受者肝细胞代替。此外，据显示，移植的肝细胞类似于正常的肝细胞，表现出糖原储存和糖原性酶的表达，并且它们在构建正常间隙键的同时增殖。已知多能干细胞在体外和体内分化为肝细胞样细胞。已经提出，Apolt模型中的多能干细胞移植可以促进自由肝的再生并恢复正常功能。