マタナルキメラ細胞の寛容制御により胆道閉鎖症の完全自己肝生存を実現する

通过母体嵌合细胞的耐受控制实现胆道闭锁患者的自体肝脏完全存活

• 批准号: 22K08758
• 负责人: 鳥飼 源史
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08758/
• 关键词: 胆道閉鎖症; 母親由来キメラ細胞; 原因論; GvHDモデルマウス; Maternal microchimerism; 自己肝生存率; GvHD; 胆道閉鎖症; 母親由来キメラ細胞; 原因論; GvHDモデルマウス; Maternal microchimerism; 自己肝生存率; GvHD

今回使用予定のGvHDモデルマウスは、MHCは一致しているがマイナー抗原が異なるBALB/Cマウスをhost、B10D2マウスをgraftとして作成する。そしてGraftを脾臓および骨髄細胞とし、Graftを腹腔からと門脈から注入する２群で免疫反応の広がりを比較検討する。つまり、B10D2マウスの骨髄細胞を門脈に注入することで、妊娠中に臍帯静脈から母親細胞が最初に肝臓を通過するモデルとなり、肝GvHDが強く生じるかを分析することが目的である。現在、生後6か月まで、月に一度の体重測定、体毛の状態、下痢などの消化管症状、全身状態の観察および6か月後に犠死せしめ肝臓と胆汁、血液検体を摘出し、検体情報を収集している。また、これらの検体を採取し、肝臓と胆汁、血液検体における、病理組織学的検索および炎症マーカーについての評価を行っている。病理組織学的検索および炎症マーカーの評価として、血中、胆汁中のIL-6およびIL-2の測定を行っている。肝組織のCD8+,Treg,CXCL9、IL-6, IL-2の免疫染色については、腸粘膜組織は検体も十分に採取でき、染色できているが、胸腺組織および皮膚については、組織採取にとどまり、免疫染色待ちの状態である。

我们计划使用此时间的GVHD模型小鼠将被创建为具有匹配MHC但次要次要抗原的宿主BALB/C小鼠，以及Graft B10D2小鼠。然后将免疫反应的扩散比较并在两组中进行检查，其中移植物用作脾脏和骨髓细胞，并从腹膜腔和门静脉中注入移植物。换句话说，通过将B10D2小鼠的骨髓细胞注入门静脉中，目的是形成一个模型，在该模型中，母细胞在怀孕期间首先从脐静脉通过肝脏通过肝脏，并分析是否强烈产生肝脏GVHD。目前，在六个月的时间内，他每月进行测量，监测其胃肠道症状，例如头发状况，腹泻和一般状况，并在六个月后牺牲以去除肝脏，胆汁和血液标本，并收集样品信息。还收集了这些标本，并对肝脏，胆汁和血液标本中炎症标记的组织病理学搜索和评估。炎症标记的组织病理学搜索和评估涉及在血液和胆汁中测量IL-6和IL-2。关于CD8+，TREG，CXCL9，IL-6和IL-2的肝组织免疫染色，肠粘膜组织已充分采样和染色，但是对于胸腺组织和皮肤，组织仅收集并等待免疫抑制。