プロオピオメラノコルチン遺伝子の転写抑制メカニズムの解明

阐明阿黑皮质素原基因的转录抑制机制

• 批准号: 21K08568
• 负责人: 高安 忍
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08568/
• 关键词: プロオピオメラノコルチン; 転写調節; グルココルチコイド; ACTH

難病である副腎皮質刺激ホルモン(ACTH)産生下垂体腫瘍（クッシング病）は、良性腫瘍にもかかわらず、慢性的なACTH産生分泌とそれに引き続いての副腎皮質ホルモンの過剰に伴い様々な合併症を引き起こして、生命予後に重大な影響を及ぼす臨床的悪性疾患である。通常、副腎皮質ホルモンが過剰になりすぎないようにACTHの合成および分泌が制御（ネガティブフィードバック）されているが、クッシング病ではこの機構が十分に作用しない状態にある。明らかとなっていないACTH前駆体のプロオピオメラノコルチン（POMC）遺伝子の抑制メカニズムを解明することによって、クッシング病の薬物治療につなげることを目的とした研究である。ネガティブフィードバックに関与する未知のPOMC遺伝子調節領域を推定するため、マウスACTH産生下垂体腫瘍細胞株AtT-20細胞において、既知のPOMC -7 kbエンハンサー領域とプロモーター領域をターゲットとした遺伝子座特異的クロマチン免疫沈降法（enChIP）の系を樹立し、引き続いて網羅的核酸シークエンス解析を行った。-7 kbエンハンサー領域とプロモーター領域に共通して近接している領域、また、それぞれに特異的に近接している領域を同定した。さらに、GCによって近接が強くなる領域、逆に離脱する領域の候補も同定した。Mediator complexのクロマチン免疫沈降シークエンス（ChIP-seq）のdataと比較した結果、共通する領域は非常に少なかった一方で、Cap analysis of gene expression (CAGE)で得られたエンハンサー候補（双方向性の転写物のある領域）の存在領域との関連についてはある傾向が見出された。これらを総合的に解釈した結果、-7 kbエンハンサー領域とプロモーター領域のGCによる調節機構が異なっている可能性が考えられた。

可治疗疾病是肾上腺皮质激素（ACTH）产生的垂体肿瘤（Cushing的疾病），是一种临床恶性疾病，尽管是一种良性肿瘤，但由于良性肿瘤而导致长期的ACTH产生，分泌的生产，后来导致严重的肾上腺皮质激素，从而导致严重的肾上腺皮质激素，从而导致了严重的后果。通常，ACTH的合成和分泌受到控制（负反馈），以防止过度的皮质肾上腺激素，但是在Cushing的疾病中，这种机制不够有效。这项研究旨在通过阐明抑制前体的ACTH前体的抑制抑制蛋白质素（POMC）基因来导致库欣氏病的药物治疗。为了估计涉及负反馈的未知POMC基因调节区域，在小鼠产生的垂体垂体肿瘤细胞系ATT-20细胞中建立了基因座特异性的染色质免疫沉淀（ENCHIP）系统，靶向已知的POMC -7 KB增强剂区域和启动子区域，随后进行全面的核酸酸性核酸序列分析。通常鉴定出通常毗邻-7 Kb增强子区域和启动子区域的区域以及特别与每个区域相邻的区域。此外，由于GC而变得更加接近的候选地区，相反，也确定了离开的地区。当比较介体复合物的染色质免疫沉淀序列（CHIP-SEQ）虽然公共区域很少，但发现与通过基因表达的CAP分析（CAGE）获得的增强子候选物（具有双向转录的区域）的存在相关的趋势。由于对这些的全面解释，因此认为-7 Kb增强子区域和启动子区域的GC调节机制可能有所不同。

项目成果

マウス下垂体ACTH産生細胞株AtT-20におけるシグナル依存性/非依存性遺伝子の転写調節機構

小鼠垂体ACTH产生细胞系AtT-20中信号依赖性/非依赖性基因的转录调控机制

• 发表时间: 2021
• 作者: Suzuki Masaki;Urai Shin;Fukuoka Hidenori;Hirota Yushi;Yamamoto Masaaki;Okada Yuko;Yamamoto Naoki;Shichi Hiroki;Fujita Yasunori;Kanie Keitaro;Iguchi Genzo;Takahashi Yutaka;Ogawa Wataru;髙安 忍
• 通讯作者: 髙安 忍