新規生理活性ペプチドQRFPのH-P-Aaxisへの関与

新型生物活性肽 QRFP 参与 H-P 轴

• 批准号: 22790880
• 负责人: 高安 忍
• 金额: $ 0.92万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22790880/
• 关键词: QRFP; GPR103; H-P-A axis; CRH; ACTH

G蛋白共役型受容体GPR103は視床下部を含めた脳の広い範囲に発現し、その内因性ペプチドリガンドQRFPは視床下部、特に室傍核と外側野にGPR103と互いに異なる局在を示して発現して摂食亢進を含む体内代謝調節に関与し、下流として覚醒やストレスなどに関与するような他の経路を利用していることが示唆されている。この研究の目的は、QRFPの視床下部-下垂体-副腎系(H-P-A axis)への関与とメカニズムを明らかにし、新たなストレス反応の一面を見出して、関連疾患の病態解明へと導くことにある。培養細胞株におけるH-P-A関連遺伝子誘導の解析を行った。RT-PCRによって視床下部4B細胞においてQRFPとGPR103サブタイプAのmRNAの発現を、またマウス副腎皮質刺激ホルモン(ACTH)産生下垂体腫瘍細胞株AtT-20においてGPR103サブタイプB mRNAの発現を確認した。コルチコトロピン放出ホルモン(CRH)プロモーターをホタルルシフェラーゼ遺伝子に結合させたレポーター遺伝子を一過性に4B細胞へ発現させQRFPを添加したところ、その転写活性の増強が確認された。さらに4B細胞へQRFPを添加し、定量RT-PCRによってCRH mRNA発現の変化を評価したところ、時間関連性にCRH遺伝子発現の増加が確認された。またプロピオメラノコルチン(POMC)プロモーターをルシフェラーゼに結合させたレポーターを一過性にまた恒常的に発現させたAtT-20に同様にQRFPを添加したところ、その転写活性の増強が確認された。以上からQRFPが直接下垂体ACTH産生細胞に、あるいは視床下部CRH産生を介して間接的にACTH産生を促進することでストレス反応の一端を担っている可能性が示された。QRFP-GPR103システムがH-P-A axisへ介入するという新たなメカニズムの存在を示唆する知見と考えられる。

G蛋白耦合受体GPR103在包括下丘脑在内的广泛大脑中表达，其内源性肽配体QRFP与GPR103在下丘脑中表现出不同的位置，尤其是副脑丘脑和外侧核的含量，并参与了其他涉及的IS，以及其他涉及的IS摄入量，以及供应量的AREAK，并参与了供应量，并参与了供应量。和压力为下游。这项研究的目的是阐明QRFP参与下丘脑 - 垂体 - 肾上腺系统（H-P-A轴），发现压力反应的新方面，并引导患者阐明相关疾病病理学。对培养细胞系中H-P-A相关基因诱导的分析。通过RT-PCR证实了下丘脑4B细胞中QRFP和GPR103亚型A mRNA的表达，而GPR103亚型B mRNA在小鼠皮质激素（ACTH）中 - 产生垂体肿瘤细胞系ATT-20。将皮质激素释放激素（CRH）启动子与萤火虫荧光素酶基因相连的报告基因在4B细胞中瞬时表达，并添加QRFP以确认其转录活性增强了。此外，将QRFP添加到4B细胞中，并通过定量RT-PCR评估CRH mRNA表达的变化，并确认CRH基因表达的时间相关。此外，将QRFP添加到ATT-20中，该QRFP瞬时和组成式表达了一个记者，其中丙型素皮质素（POMC）启动子与荧光素酶结合，并确认其转录活性。这表明QRFP可以通过直接促进垂体ACTH产生的细胞或通过下丘脑CRH产生间接促进ACTH的产生来参与应力反应。这一发现表明存在一种新机制，其中QRFP-GPR103系统介入H-P-A轴中。