Establishment of psoriasis biomarkers using keratinocytes

使用角质形成细胞建立银屑病生物标志物

基本信息

批准号：
21K08334
负责人：
石河晃
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Toho University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08334/
关键词：
乾癬バイオマーカーテープストリッピング

项目摘要

我々はこの研究開始までに乾癬患者からテープストリッピング法を用いて角質細胞を採取し、超音波破砕法を用いて蛋白を抽出し、ＥＬＩＳＡ法にてS100A8/A9を定量する方法を確立し乾癬の病勢を客観的に判断できるモニタリングバイオマーカーとして有力であることを明らかにした。今回の研究で我々は多数の乾癬患者に対し、経時的に角質細胞S100A8/A9を測定し、治療変更に伴う病勢変化とS100A8/A9変化の時間的関係性、治療の種類による変化の違い、病型による変化の違いを明らかにすることにより、本方法の病勢モニタリングとしての鋭敏度を明らかにすること、治療反応性との比較検討により治療反応性予測マーカーとして機能できるか明らかにする。また、臨床応用可能な測定キットの開発を検討した。検査キットとしてイムノクロマト法による迅速診断の可能性を模索したが、企業との検討の結果、定量性に劣ることから断念した。ELISA法施行までの蛋白抽出の簡便化を図るべく、超音波破砕法に変わるアルカリ抽出法を用いて検討を行ったが、結果が安定しないことから超音波破砕法を今後も用いることとした。新規受診あるいは受診継続している乾癬患者の異なる解剖学的部位にある皮疹3か所からテープストリッピング法にて角質細胞を3時点において採取しS100A8/A9を測定した。また、同時に、患者の病勢評価としてPASI（Psoriasis Area and Severity Index）スコアおよび局所のmPASIスコアを算出し比較をおこなった。その結果、角質細胞S100A8/A9は全身のPASIよりも検体採取部位局所のmPASIスコアとより強い相関がみられ、治療法に関わらず、皮疹部位の病勢を鋭敏に反映することが明らかとなった。この結果は2023年8月に開催される第38回日本乾癬学会にて発表する予定である。

在本研究开始之前，我们建立了一种使用胶带剥离，使用超声破坏提取蛋白质的蛋白质，并使用ELISA量化S100A8/A9的蛋白质，这是一种有希望的生物标志物，以确定牛皮癣的疾病状态。在这项研究中，我们在许多银屑病患者中测量了角质细胞S100A8/A9，并阐明疾病状态的变化与S100A8/A9的时间关系，治疗变化，治疗类型变化变化的变化以及疾病类型的变化差异以及疾病类型的变化差异，并通过对疾病的响应进行响应，是否可以对其进行治疗，是否可以对其进行治疗，是否可以对其进行响应，是否可以对其进行治疗，是否可以进行治疗。我们还检查了临床适用的测量套件的开发。他们寻求使用免疫色谱法作为测试套件进行快速诊断的可能性，但是在考虑了公司之后，他们就放弃了，因为它的定量性很差。为了简化蛋白质提取，直到实施ELISA方法，我们使用碱提取方法进行了研究，即超声波裂方法，但是由于结果不稳定，因此决定将来继续使用它。在新的或持续的银屑病患者的不同解剖部位，使用胶带剥离和S100A8/A9在不同解剖部位的三个皮疹中收集角质形成细胞。同时，计算了PASI（牛皮癣区域和严重程度指数）评分和局部MPASI评分，并将其视为患者疾病评估。结果，发现角蛋白细胞S100A8/A9与样品收集本地的MPASI评分比全身的PASI更强，并且无论治疗方法如何，反映皮肤喷发部位的疾病状态是明智的。结果计划在2023年8月举行的日本第38个牛皮癣学会上介绍。