炎症抑制能を有する腸管上皮間リンパ球の分化誘導機構の解明

阐明具有抗炎能力的肠上皮间淋巴细胞的分化诱导机制

• 批准号: 21K07084
• 负责人: 大野 恵子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07084/
• 关键词: 腸管上皮間リンパ球; 転写因子; 炎症性腸疾患

潰瘍性大腸炎やクローン病などの炎症性腸疾患(Inflammatory bowel disease;IBD)は、慢性消化管炎症をきたす疾患であり、本邦でも増加の一途を辿っている。腸管粘膜には炎症励起に関与するヘルパーT細胞と、炎症抑制に関与する制御性T細胞が存在するが、これらの免疫細胞のバランスが腸管免疫の恒常性維持に重要であり、腸管免疫の恒常性の破綻がIBDの病態の一つとして考えられている。近年、腸管上皮間にCD4とCD8αを両方発現するユニークな細胞集団(CD4IEL)が存在し、炎症抑制能を有し、IBD患者で減少することから、CD4IELの分化誘導機構の解明がIBDの新規治療開発に重要であると考えられる。CD4IELの分化にはレチノイン酸、TGFβ、IFNγなどのサイトカインや腸内細菌の存在が必須であり、それらのシグナルにより誘導されるThPOKの減弱とT-bet, Runx3の上昇など転写因子の発現変化が必要である。一方で、なぜCD4IELが腸管上皮間のみでしか観察されないのかは不明である。近年、2光子顕微鏡の使用により、腸管内における免疫細胞の局在、動態を解析することができるようになっており、本研究では、腸管上皮間CD4IELの動態を含め、分化に関わる詳細な制御機構を明らかにすることを目的として検討を行った。腸管にホーミングするにはT細胞はCCR9、α4β7といった因子を発現しており、腸管内のT細胞を中心にCCR9、α4β7の発現を解析した。腸管粘膜固有層内におけるCCR9、α4β7の発現は高かったものの、腸管上皮内に存在するT細胞での発現は減弱していた。さらに興味深いことに、腸管内において粘膜固有層、腸管上皮内を往来できる制御性T細胞においては発現が維持されていることを見出した。また、腸管上皮間リンパ球のsingle cell RNA-sequence解析を行い、CD4IELの分化過程における遺伝子発現解析を行った。

溃疡性结肠炎、克罗恩病等炎症性肠病（IBD）是引起胃肠道慢性炎症的疾病，在日本发病率不断增加。在肠粘膜中，有参与炎症激发的辅助性T细胞和参与抑制炎症的调节性T细胞。这些免疫细胞的平衡对于维持肠道免疫的稳态非常重要。 IBD 的病理之一。近年来，肠上皮之间存在一种同时表达CD4和CD8α的独特细胞群（CD4IEL），具有抑制炎症的能力，并且在IBD患者中减少，阐明CD4IEL的分化诱导机制是一个新领域。它被认为对治疗开发很重要。视黄酸、TGFβ、IFNγ等细胞因子和肠道细菌的存在对于CD4IEL分化是必需的，这些信号诱导ThPOK减弱、T-bet和Runx3增加等转录因子表达的变化是必要的。 。另一方面，尚不清楚为什么 CD4IEL 仅在肠上皮之间观察到。近年来，双光子显微镜的使用使得分析肠道内免疫细胞的定位和动态成为可能，本研究的目的是阐明其机制。为了归巢于肠道，T细胞表达CCR9和α4β7等因子，我们分析了CCR9和α4β7主要在肠道T细胞中的表达。尽管肠固有层中 CCR9 和 α4β7 的表达较高，但肠上皮中 T 细胞的表达减弱。更有趣的是，我们发现调节性 T 细胞中维持了表达，这些细胞可以在肠道固有层和肠上皮内移动。我们还对肠上皮间淋巴细胞进行了单细胞RNA序列分析，并分析了CD4IEL分化过程中的基因表达。