皮膚炎を自然発症するBalb/c背景Themis遺伝子欠損マウスの解析

Balb/c 背景 Themis 基因缺陷小鼠自发发生皮炎的分析

• 批准号: 21K06959
• 负责人: 宮崎 幸造
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: National Center for Global Health and Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06959/
• 关键词: Themis; 自然発症; 皮膚炎; 眼瞼炎; 遺伝子欠損マウス; コンディショナル遺伝子欠損マウス

令和4年度は、昨年度に引き続き、Themis-KO/Balb/cマウスおいて発症する皮膚炎/眼瞼炎の分子生物学的解析、Balb/c背景Themisコンディショナルノックアウトマウスの作製を行った。Themis-KO/Balb/cマウスにて発症する皮膚炎/眼瞼炎の分子生物学的解析では、炎症部位より採取したmRNAを用い定量PCRを行ったところ、IFNgの発現は見られなかった。一方でIL-4の発現上昇がみられることからIL-4依存性の炎症ではないかと思われる。一方でIL-17Aの発現は低く、野生型と変わらなかった。現在、IL-22、TSLPといった分子、さらには臨床における乾癬やアトピー性性皮膚炎のバイオマーカーについてについても検証を行っている。Balb/c背景Themisコンディショナルノックアウトマウスの作製については、戻し交配を終了し、タモキシフェン投与により、Themis遺伝子が欠損することを確認している。現在、個体数を増やし、成体になってからThemisを欠損させた合での病態発症の検証の検証を行うと同時に、同マウスから得られたCD4ナイーブT細胞をRag2欠損マウスに移入することにより病態を発症するかどうかを検証している。加えて、炎症がTh17細胞でない可能性も出てきたことから、他の免疫細胞についても早急に解析を進めている。ケラチノサイト及び樹状細胞については、次年度で行う事とした。以上の事から、Themis-KO/Balb/cマウスにおける病態の解析について、一部遅れは出ているものの、本年度以降への準備も順調に進んでいると言える。

继去年之后，2020年度，我们对Themis-KO/Balb/c小鼠发生的皮炎/睑缘炎进行了分子生物学分析，制作了Balb/c背景Themis条件敲除小鼠。在对 Themis-KO/Balb/c 小鼠皮炎/睑缘炎的分子生物学分析中，使用从炎症部位收集的 mRNA 进行定量 PCR 时，未观察到 IFNg 的表达。另一方面，由于观察到IL-4表达增加，因此似乎是IL-4依赖性炎症。另一方面，IL-17A的表达较低，与野生型没有差异。目前，我们正在研究 IL-22 和 TSLP 等分子，以及牛皮癣和特应性皮炎的临床生物标志物。关于Balb/c背景Themis条件敲除小鼠的制作，我们通过完成回交和给予他莫昔芬确认了Themis基因被删除。目前，我们正在增加小鼠数量，验证成年后删除 Themis 后病理状况的发生，同时，我们将从同一小鼠中获得的 CD4 幼稚 T 细胞转移到 Rag2 缺陷小鼠中。正在验证疾病是否发展。此外，炎症可能不是由 Th17 细胞引起的，因此我们也在继续对其他免疫细胞进行分析。关于角质形成细胞和树突状细胞，决定明年进行。综上所述，虽然Themis-KO/Balb/c小鼠的病理情况分析存在一定的延迟，但可以说今年及以后的准备工作进展顺利。

项目成果

眼瞼炎を自然発症するThemis欠損マウスの解析

自发发生睑缘炎的 Themis 缺陷小鼠的分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 宮崎幸造;為広紀正;北島雅之;木村彰宏;佐藤真理;小川葉子;根岸一乃;鈴木春巳
• 通讯作者: 鈴木春巳