神経突起伸長因子LOTUSの受容体同定と分子メカニズム解析

神经突生长因子LOTUS受体鉴定及分子机制分析

• 批准号: 21K06580
• 负责人: 栗原 裕司
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06580/
• 关键词: 神経科学; 薬理学; 突起伸長; 神経再生

本研究の目的は、神経突起伸長を促進させるLOTUSの分子メカニズム解明である。本年度は、LOTUSによる神経突起伸長作用を媒介する細胞側の分子を探索すると共に、LOTUSの神経突起伸長作用を媒介する受容体の同定に着手した。研究代表者は、マウス網膜神経節細胞およびレチノイン酸処理により神経細胞様に分化したマウス神経芽細胞腫由来の細胞株Neuro2Aに対して、精製LOTUSタンパク質が結合すること、および精製LOTUS基質上で神経突起が伸長することを明らかにしている。LOTUS結合分子の精製産物を質量分析により解析した結果、神経突起伸長に関与すると報告されている分子を含め、様々な膜タンパク質を見出した。これらのLOTUS相互作用候補分子のノックダウン実験を、レチノイン酸処理し、LOTUS基質上に培養したNeuro2Aに対して実施した。その結果、とある細胞間接着因子をノックダウンしたNeuro2Aの突起長が短いことを見出し、この細胞間接着因子がLOTUSと相互作用することを明らかにした。

本研究的目的是阐明 LOTUS 促进神经突生长的分子机制。今年，我们开始寻找介导 LOTUS 神经突生长作用的细胞侧分子，并鉴定介导 LOTUS 神经突生长作用的受体。主要研究人员证明，纯化的 LOTUS 蛋白可与小鼠视网膜神经节细胞和 Neuro2A（一种源自小鼠神经母细胞瘤的细胞系，通过视黄酸处理分化为神经元样细胞）结合，并且神经递质可与小鼠视网膜神经节细胞和 Neuro2A 结合纯化的 LOTUS 基质上的细胞很明显突起伸长。通过对 LOTUS 结合分子的纯化产物进行质谱分析，我们发现了各种膜蛋白，包括据报道参与神经突生长的分子。这些与 LOTUS 相互作用的候选分子的敲低实验是在用视黄酸处理并在 LOTUS 基质上培养的 Neuro2A 上进行的。结果，他们发现某种细胞间粘附因子被敲低的Neuro2A的突出长度更短，并且揭示了该细胞间粘附因子与LOTUS相互作用。