Potyvirus柱状内含体-胞间连丝连接装置的三维重构及病毒胞间运动研究

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31070129
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    34.0万
  • 负责人：
    洪健
  • 依托单位：
    浙江大学
  • 学科分类：
    C0107.病毒学
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

以马铃薯Y病毒属（Potyvirus）的高梁花叶病毒（SrMV）和大豆花叶病毒（SMV）为材料，运用透射电子显微镜观察细胞感染初期柱状内含体与胞间连丝的连接装置（CI-PD），用电子断层扫描成像技术（Electron Tomography）重构CI-PD及游离CI的三维立体结构，结合CI蛋白、病毒外壳蛋白（CP）、VPg免疫标记和病毒RNA原位杂交，了解CI定位胞间连丝输送病毒完成胞间运动的过程及运动方式；同时通过离体CI片段及其附着物的高分辨电镜和原子力显微镜观察，结合冷冻电子断层扫描成像技术进行三维重构，明确胞间运动的粒子形式，获得CI-PD作为胞间运动关键装置的直接证据，为弄清Potyvirus胞间运动机制，了解病毒与寄主植物的互作关系，探索病毒病防治新途径奠定基础。

结项摘要

本项目以马铃薯Y病毒属（Potyvirus）的芜菁花叶病毒（TuMV）和高梁花叶病毒（SrMV）为材料，通过透射电子显微镜观察病毒不同感染时段的细胞病毒变化，用电子断层扫描成像技术（Electron Tomography）重构感染初期柱状内含体与胞间连丝的连接装置（CI-PD）及感染后期游离CI的三维立体结构，结合CI蛋白、PIPO蛋白、外壳蛋白CP的免疫标记和病毒dsRNA定位，了解CI定位胞间连丝输送病毒完成胞间运动的过程及运动方式。结果发现在病毒感染早期，大部分CI连接于胞间连丝处，表明病毒正在大批量地进行胞间运动。在感染后期，细胞中形成大量子代病毒，CI散落在细胞质中，表明CI不再充当病毒胞间运输装置，开始被细胞降解途径降解。实验找到了病毒粒子在胞间连丝处与柱状内含体相连，正在由胞间连丝的连接小管穿过胞间连丝的直接电镜证据，同时还发现胞间运动时寄主细胞壁结构成份的变化。本研究结果明确了Potyvirus以完整粒子形式进行胞间运动，充实了该类病毒的体内运输机理，为了解病毒与寄主植物的互作关系，探索病毒病防治新途径提供了基础资料。

项目成果

期刊论文数量（0）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
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