厚朴酚调控金黄色葡萄球菌毒力蛋白质组的高通量分析和确证

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30972212
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    30.0万
  • 负责人：
    冯海华
  • 依托单位：
    吉林大学
  • 学科分类：
    C1808.兽医药物学与毒理学
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

金黄色葡萄球菌（S.aureus）是引起人类和动物临床感染的最主要的一种病原菌，其耐药菌株的播散大大增加了治疗难度。因此，找到新的治疗方案或有效药物已成为现阶段刻不容缓的任务和使命。厚朴酚是从中药厚朴中分离到的一种抗菌活性成分，我们在前期研究中，将厚朴酚作用于金黄色葡萄球菌，通过基因芯片高通量分析，结果表明厚朴酚调节了550个金黄色葡萄球菌基因的转录，其中以抑制毒力及其调节基因最明显，但mRNA的变化不能明确地反映执行功能的蛋白质变化水平。因此本项目将应用比较蛋白质组学方法，以二维电泳、MALDI-TOF/MS及ICAT-LC/MS等技术对金黄色葡萄球菌毒力蛋白的表达进行高通量分析，并结合生物信息学及蛋白验证方法对其调控机制进行分析确证，阐明厚朴酚抗金黄色葡萄球菌作用的的靶机制，为探索厚朴酚作用靶标并为其结构改造与优化奠定理论基础。

结项摘要

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是社区获得性和医院感染性疾病常见病原体之一，具有较高的发病率和死亡率。为了全面了解中药单体活性成分厚朴酚的抗菌作用，本项目确定了厚朴酚对金黄色葡萄球菌ATCC 29213的最小抑菌浓度（MIC）为16ug/ml。生长曲线测定结果厚朴酚对金葡菌的生长具有明显的抑制作用并且呈剂量依赖性。根据有效MIC，用不同亚抑菌浓度的厚朴酚处理金葡菌，通过双向电泳技术和MALDI-TOF/MS分析亚抑菌浓度厚朴酚对S. aureus外分泌蛋白表达的影响。结果表明亚抑菌浓度的厚朴酚抑制了金葡菌保守区蛋白, 胞嘧啶核苷酸激酶, clp protease，a hypothetical protein, LysR family transcriptional regulator 和alkyl hydroperoxide reductase的表达。亚抑菌浓度的厚朴酚对金葡菌醛脱氢酶，DNA 拓扑异构酶,延伸因子Tu, D-ornithine aminomutase S component, 噬菌体SPP1 结构蛋白，琥珀酸辅酶A连接酶和glycerophosphoryl diester phosphodiesterase的表达表现出上调作用。S. aureus的致病性与其它革兰氏阳性菌相似，大都取决于产生的胞外毒力因子。已知S. aureus可产生多种毒力因子，其中主要有α-溶血素、肠毒素等并对机体造成严重的损害。对在双向电泳分析结果中未体现的典型毒力因子，通过Western-blot方法进行补充验证。结果显示亚抑菌浓度的厚朴酚对S. aureus α-溶血素, SEA和SEB的表达具有明显的抑制作用并呈剂量依赖性。S. aureus外分泌蛋白可以诱导宿主细胞产生TNF和其它细胞因子。肿瘤因子释放试验显示亚抑菌浓度的厚朴酚降低了金葡菌诱导肿瘤因子释放的活性并呈剂量依赖性。本项目评价了活性成份厚朴酚对S. aureus的抗菌活性，分析其对金葡菌外分泌蛋白表达的影响包括厚朴酚对α-溶血素、SEA、SEB的抑制作用，初步探索厚朴酚治疗金葡菌的相关作用机制，为其更深入的研究奠定基础。结果表明中药单体厚朴酚对金黄色葡萄球菌具有较好的抗菌活性，其亚抑菌浓度时可调控金黄色葡萄球菌毒力相关蛋白的表达，将有助于治疗由金黄色葡萄球菌导致的感染。

项目成果

期刊论文数量（11）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
p-Cymene Modulates In Vitro and In Vivo Cytokine Production by Inhibiting MAPK and NF-B Activation
对伞花烃通过抑制 MAPK 和 NF- 调节体外和体内细胞因子的产生
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
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  • 期刊：
    Inflammation
  • 影响因子：
    5.1
  • 作者：
    Zhong W, Chi G, Jiang L, Soromou LW, Chen N, Huo M
  • 通讯作者：
    Zhong W, Chi G, Jiang L, Soromou LW, Chen N, Huo M
In vitro and in vivo protection provided by pinocembrin against lipopolysaccharide-induced inflammatory responses
Pinocembrin 对脂多糖诱导的炎症反应提供体外和体内保护
  • DOI：
    10.1016/j.intimp.2012.06.009
  • 发表时间：
    2012-09-01
  • 期刊：
    INTERNATIONAL IMMUNOPHARMACOLOGY
  • 影响因子：
    5.6
  • 作者：
    Soromou, Lanan Wassy;Chu, Xiao;Deng, Xuming
  • 通讯作者：
    Deng, Xuming
Imperatorin Attenuates LPS-Induced Inflammation by Suppressing NF-kappa B and MAPKs Activation in RAW 264.7 Macrophages
欧前胡素通过抑制 RAW 264.7 巨噬细胞中 NF-kappa B 和 MAPK 的激活来减轻 LPS 引起的炎症
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
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  • 期刊：
    Inflammation
  • 影响因子：
    5.1
  • 作者：
    Guo, Weixiao;Feng, Haihua;Sun, Jingjing;Jiang, Lanxiang;Duan, Lingxin;Huo, Meixia;Chen, Na;Zhong, Weiting;Wassy, Lanan;Yang, Zhenguo
  • 通讯作者：
    Yang, Zhenguo
Subinhibitory concentrations of licochalcone A decrease alpha-toxin production in both methicillin-sensitive and methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolates
甘草查耳酮 A 的亚抑制浓度可减少甲氧西林敏感和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离株中 α 毒素的产生
  • DOI：
    10.1111/j.1472-765x.2009.02783.x
  • 发表时间：
    2010-02-01
  • 期刊：
    LETTERS IN APPLIED MICROBIOLOGY
  • 影响因子：
    2.4
  • 作者：
    Qiu, J.;Jiang, Y.;Deng, X.
  • 通讯作者：
    Deng, X.
Traditional medicine alpinetin inhibits the inflammatory response in Raw 264.7 cells and mouse models
传统药物高山素抑制Raw 264.7细胞和小鼠模型的炎症反应
  • DOI：
    10.1016/j.intimp.2011.11.017
  • 发表时间：
    2012-01-01
  • 期刊：
    INTERNATIONAL IMMUNOPHARMACOLOGY
  • 影响因子：
    5.6
  • 作者：
    Huo, Meixia;Chen, Na;Feng, Haihua
  • 通讯作者：
    Feng, Haihua

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其他文献

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  • 发表时间：
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  • 影响因子：
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  • 发表时间：
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  • 作者：
    张璐;韩玉帅;郭斌;王守堂;田学超;冯海华;岳占碰
  • 通讯作者：
    岳占碰
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    10.13327/j.jjlau.2016.2990
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  • 期刊：
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  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张星星;石蕾;任艳蕾;仇佳明;邓旭明;冯海华
  • 通讯作者：
    冯海华

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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