益气活血解毒方通过AF-SMC间缝隙连接通道抑制成纤维细胞对平滑肌细胞活化的研究

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基本信息

  • 批准号：
    81173234
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    57.0万
  • 负责人：
    赵明镜
  • 依托单位：
    北京中医药大学
  • 学科分类：
    H3108.中医内科学
  • 结题年份：
    2015
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2015-12-31

项目摘要

在血管重构研究中，外膜和中膜的相互作用一直是研究的盲点，基于前期研究，益气活血解毒方能减少血管损伤后新生内膜增生，抑制成纤维细胞活化迁移和分泌，抑制外膜炎症。本研究采用球囊损伤颈动脉模型，观察外膜炎症及缝隙连接蛋白的变化。采用成纤维细胞（AF)和平滑肌细胞(SMC)共培养模型，从AF对SMC作用的角度观察： AF被脂多糖活化后分泌活性物质的变化；AF与SMC间缝隙连接的结构和功能以及缝隙连接蛋白Cx43和mRNA的变化；沉默Cx43 RNA对缝隙连接的影响；AF对SMC活化增殖迁移的影响；以探讨AF通过AF-SMC间缝隙连接活化SMC的作用；阐明益气活血解毒方抑制炎性介质活化AF和抑制AF-SMC间的缝隙连接通道的机制。首次用中医外科创伤修复的思路治疗心血管疾病，创造性研究AF与SMC间缝隙连接的作用，为中医药防治再狭窄、高血压、动脉粥样硬化等血管重构性疾病开辟了新思路治疗新手段。

结项摘要

血管重构是PCI后再狭窄、高血压、动脉粥样硬化等疾病共同的病理机制，中膜平滑肌细胞(SMC)和外膜成纤维细胞（AF)分别通过活化迁移和分泌参与血管重构的形成，然而当AF穿过中膜进入新生内膜时，是否对SMC产生作用并影响血管重构呢？本研究采用球囊损伤大鼠颈动脉模型、AF和SMC共培养等方法，观察血管重构、炎症反应、缝隙连接、AF对SMC活化和分泌的影响以及中药益气活血解毒方的干预作用。.结果表明，球囊损伤后7天，颈总动脉内膜轻度增生，而外膜的厚度和面积均明显增加，以正性重构为主；28天时，内膜明显增生，狭窄率为23%，外膜增厚已消失，以负性重构为主。血管损伤后7天，MCP-1、CD68和Cx43蛋白的表达在血管壁内、中、外膜各层均增加，尤其以外膜增加最为显著，且浓度远高于中膜和内膜；益气活血解毒组可明显减少内膜增生；减少巨噬细胞浸润(CD68)，下调Cx43阳性表达面积，但降低MCP-1的作用并不明显。.电镜发现，球囊损伤血管内膜后，外膜成纤维细胞活化为纤维母细胞，胞内有大量粗面内质网和线粒体，可见到活化的纤维母细胞穿过外弹力板向中膜穿行的瞬间，迁移到中膜的纤维母细胞转变成了肌纤维母细胞。模型组中膜的缝隙连接明显增加，其发生于活化的平滑肌之间，肌纤维母细胞与活化的平滑肌细胞也形成了大量缝隙连接。电镜观察体外培养的细胞，在直接接触共培养的AF和SMC之间，可看到缝隙连接结构，但AF和SMC在PET膜上不能形成缝隙连接。.炎性介质酵母多糖和脂多糖明显促进体外培养的AF增殖；LPS可明显刺激AF分泌细胞因子MCP-1、IL-6；活化后的AF明显促进SMC的活化以及MCP-1、TIMP-1和Cx43蛋白的表达增加。中药主要成分/组分黄芪多糖、丹参素、绿原酸均可显著地抑制细胞增殖，减少SMC 中MCP-1、TIMP-1和Cx43的表达。 .本研究表明，AF和SMC在血管重构中并非孤立的，在机械损伤和炎症反应可刺激AF活化，AF活化后通过释放炎症因子和与SMC间形成的缝隙连接，促进SMC活化和释放炎症因子，促进血管重构的发生。益气活血解毒方通过抑制外膜和AF的增殖，减少对SMC的活化、炎症因子释放和缝隙连接蛋白的表达，从而防止血管重构。本研究阐明了血管重构新的病理机制，为中医药防治该病提供了新的思路和治疗手段。

项目成果

期刊论文数量（4）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
益气活血解毒方对球囊损伤后大鼠颈动脉早期血管重构和炎性因子的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    辽宁中医杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    赵一舟;吕晞滢;赵保胜;杨瑞薛
  • 通讯作者：
    杨瑞薛
Yiqihuoxuejiedu Formula Restrains Vascular Remodeling by Reducing the Inflammation Reaction and Cx43 Expression in the Adventitia after Balloon Injury
益气活血解毒方通过减少球囊损伤后外膜炎症反应和Cx43表达抑制血管重塑
  • DOI：
    10.1155/2015/904273
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Chang H;Lei H;Zhao Y;Yang R;Wu A;Mao Y;Huang Y;Lv X;Zhao J;Lou L;Zhang D;He Y;Xu Y;Yang T;Zhao M
  • 通讯作者：
    Zhao M
Study progress of homocellular and heterocellular gap junctions in vessel wall
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  • DOI：
    10.5897/ajpp12.1281
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    African Journal of Pharmacy and Pharmacology
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Yingkun He1†; Kuo Gao2†; Mingjing Zhao1*; Hong
  • 通讯作者：
    Hong
Yiqihuoxuejiedu Formula Inhibits Vascular Remodeling by Reducing Proliferation and Secretion of Adventitial Fibroblast after Balloon Injury
益气活血解毒方通过减少球囊损伤后外膜成纤维细胞增殖和分泌抑制血管重塑
  • DOI：
    10.1155/2014/849167
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Zhao MJ;Wu AM;Wang J;Chang H;Gao YH;Liu HM;Lv XY;Lei H;Sun QQ;Xu Y;He YK;Wang SR
  • 通讯作者：
    Wang SR

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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