冠状病毒非结构蛋白nsp14的RNA外切和甲基化酶功能研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31000085
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    21.0万
  • 负责人：
    陈宇
  • 依托单位：
    武汉大学
  • 学科分类：
    C0107.病毒学
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

SARS是由SARS冠状病毒引发的高传染、高致病的恶性疾病，曾给人类社会造成巨大损失。我们近期研究发现SARS冠状病毒非结构蛋白nsp14具有RNA外切酶和N7－甲基转移酶两种活性，分别参与病毒RNA的3'-端加工和5'端加帽过程，是病毒复制周期中关键的蛋白之一，但其作用机制及其在病毒复制周期中的生物学功能还不清楚。本研究将利用我们前期工作建立的酵母高效筛选平台，结合体外生化活性实验，通过大量的氨基酸点突变筛选，揭示该蛋白两种酶活性的结构功能关系、作用机制以及相互之间是否有协同作用。同时用我们建立的SARS冠状病毒复制子验证这些位点的功能。这些研究将有利于我们根据nsp14的结构功能特点设计针对性药物，可能为抗SARS病毒药物提供一个很好的靶点，同时有助于进一步揭示SARS冠状病毒基因组复制的分子机制。

结项摘要

本课题的主要研究内容是冠状病毒基因组RNA帽子结构的甲基化修饰机制，特别是参与甲基化修饰的病毒编码的非结构蛋白（如nsp14以及nsp10/16复合体）的结构功能关系。通过本课题发现了nsp14的新的甲基化修饰功能；发现了冠状病毒2‘-O-甲基转移酶的功能，解析了其晶体结构，从而揭示了冠状病毒RNA Cap-1型帽子结构甲基化修饰的机制；并设计了2‘-O-甲基转移酶的多肽抑制剂。本课题共发表SCI论文三篇，其中包括PLoS Pathogens（IF=9.2）一篇，申请专利一项。

项目成果

期刊论文数量（3）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Short peptides derived from the interaction domain of SARS coronavirus nonstructural protein nsp10 can suppress the 2 '-O-methyltransferase activity of nsp10/nsp16 complex
源自 SARS 冠状病毒非结构蛋白 nsp10 相互作用结构域的短肽可以抑制 2
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    Virus Research
  • 影响因子：
    5
  • 作者：
    Guo, Deyin;Chen, Yu#;Wu, Andong;Sun, Ying;Su, Ceyang;Wu, Hao;Jin, Xu;Tao, Jiali;Wang, Yi
  • 通讯作者：
    Wang, Yi
Characterization of the guanine-N7 methyltransferase activity of coronavirus nsp14 on nucleotide GTP.
冠状病毒nsp14对核苷酸GTP的鸟嘌呤-N7甲基转移酶活性的表征
  • DOI：
    10.1016/j.virusres.2013.05.001
  • 发表时间：
    2013-09
  • 期刊：
    Virus research
  • 影响因子：
    5
  • 作者：
    Jin X;Chen Y;Sun Y;Zeng C;Wang Y;Tao J;Wu A;Yu X;Zhang Z;Tian J;Guo D
  • 通讯作者：
    Guo D

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  • 通讯作者：
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  • 通讯作者：
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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