多囊蛋白-2纤毛定位功能肽相互作用蛋白的鉴定及调控研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30900692
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    20.0万
  • 负责人：
    戴兵
  • 依托单位：
    中国人民解放军第二军医大学
  • 学科分类：
    H0501.泌尿系统结构、功能与发育异常
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

肾小管细胞纤毛上多囊蛋白复合体钙内流下降是常染色体显性多囊肾病（ADPKD）发病的重要分子基础，恢复多囊蛋白2（PC-2）依赖的钙内流可逆转ADPKD 病理生理过程，抑制囊肿形成。PC-2 在纤毛的正确定位是其发挥正常功能的先决条件，前期实验中，我们发现决定PC-2纤毛运输及定位的功能区位于N 端的15 个氨基酸肽段，将其称为PC-2纤毛定位功能肽。本研究中我们希望在前期研究基础上应用肽Pull-down、串联亲和纯化及质谱技术筛选与PC-2 纤毛定位功能肽相互作用的蛋白，免疫共沉淀及激光共聚焦技术进行验证，采用RNA干扰（RNAi）技术观察相互作用蛋白对PC-2 纤毛定位和钙内流的调控作用。该研究有助于我们更深入地认识PC-2 纤毛运输、定位及其调控的过程，进一步揭示ADPKD 发病机制，为寻找新的干预靶点奠定实验基础。

结项摘要

肾小管细胞纤毛上多囊蛋白复合体钙内流下降是常染色体显性多囊肾病（ADPKD）发病的重要分子基础，恢复多囊蛋白-2（PC-2）依赖的钙内流可逆转ADPKD 病理生理过程，抑制囊肿形成。PC-2 在纤毛的正确定位是其发挥正常功能的先决条件，前期实验中，我们发现决定PC-2纤毛运输及定位的功能区位于N 端的15 个氨基酸肽段，将其称为PC-2纤毛定位功能肽。本项目中我们在前期研究基础上应用肽Pull-down及质谱技术筛选与PC-2 纤毛定位功能肽相互作用的蛋白Grb2L （SH3-domain GRB2-like 2，Endophilin-I），免疫共沉淀证实Grb2L在肾小管上皮细胞的肾组织中表达并与PC-2相互结合。Grb2L的生物学功能主要是参与蛋白的运输和内吞，可抑制肿瘤细胞生长。进一步研究发现在PC-2突变细胞和pkd2 knock-out多囊肾小鼠组织中Grb2L蛋白表达下调，采用RNA干扰（RNAi）技术knock-down Grb2L后肾小管细胞PC-2表达、纤毛定位及钙内流明显下降，并出现纤毛短缩并出现囊肿表型转化，表明该蛋白可能通过维持纤毛结构及作为PC-2下游信号蛋白介导多囊肾病生成。Grb2L的发现有助于我们更深入地认识PC-2 纤毛运输、定位及其调控的过程，进一步揭示ADPKD 发病机制，为寻找新的干预靶点奠定实验基础。

项目成果

期刊论文数量（6）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Rosiglitazone Inhibits Cell Proliferation by Inducing G1 Cell Cycle Arrest and Apoptosis in ADPKD Cyst-Lining Epithelia Cells
罗格列酮通过诱导 ADPKD 囊肿内皮细胞 G1 细胞周期停滞和凋亡来抑制细胞增殖
  • DOI：
    10.1111/j.1742-7843.2010.00539.x
  • 发表时间：
    2010-06-01
  • 期刊：
    BASIC & CLINICAL PHARMACOLOGY & TOXICOLOGY
  • 影响因子：
    3.1
  • 作者：
    Liu, Yawei;Dai, Bing;Mei, Changlin
  • 通讯作者：
    Mei, Changlin
Effect of Theophylline on Prevention of Contrast-Induced Acute Kidney Injury: A Meta-analysis of Randomized Controlled Trials
茶碱对预防造影剂引起的急性肾损伤的作用：随机对照试验的荟萃分析
  • DOI：
    10.1053/j.ajkd.2012.02.332
  • 发表时间：
    2012-09-01
  • 期刊：
    AMERICAN JOURNAL OF KIDNEY DISEASES
  • 影响因子：
    13.2
  • 作者：
    Dai, Bing;Liu, Yawei;Mei, Changlin
  • 通讯作者：
    Mei, Changlin
Efficacy of Short-Term High-Dose Statin in Preventing Contrast-Induced Nephropathy: A Meta-Analysis of Seven Randomized Controlled Trials
短期大剂量他汀类药物预防造影剂肾病的疗效：七项随机对照试验的荟萃分析
  • DOI：
    10.1371/journal.pone.0034450.s001
  • 发表时间：
    2012-01-01
  • 期刊：
    Figshare
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Fu, Lili;Dai, Bing;Mei, Changlin
  • 通讯作者：
    Mei, Changlin
Efficacy of short-term high-dose statin in preventing contrast-induced nephropathy: a meta-analysis of seven randomized controlled trials.
短期大剂量他汀类药物预防造影剂肾病的疗效：七项随机对照试验的荟萃分析
  • DOI：
    10.1371/journal.pone.0034450
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    PloS one
  • 影响因子：
    3.7
  • 作者：
    Li Y;Liu Y;Fu L;Mei C;Dai B
  • 通讯作者：
    Dai B
Rosiglitazone Inhibits Transforming Growth Factor-beta 1 Mediated Fibrogenesis in ADPKD Cyst-Lining Epithelial Cells
罗格列酮抑制 ADPKD 囊肿衬里上皮细胞中转化生长因子-β 1 介导的纤维形成
  • DOI：
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  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    PLos One
  • 影响因子：
    3.7
  • 作者：
    Liu, Yawei;Dai, Bing;Xu, Chenggang;Fu, Lili;Hua, Zhenhao;Mei, Changlin
  • 通讯作者：
    Mei, Changlin

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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