GCRV外衣壳蛋白VP5自动裂解位点的功能研究

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基本信息

  • 批准号：
    30871940
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    36.0万
  • 负责人：
    方勤
  • 依托单位：
    中国科学院武汉病毒研究所
  • 学科分类：
    C1908.水产生物病原学与病害控制
  • 结题年份：
    2011
  • 批准年份：
    2008
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2009-01-01 至2011-12-31

项目摘要

为探讨GCRV外衣壳蛋白VP5在病毒进入细胞过程中的作用机理，对与起始侵染相关的VP5蛋白自动裂解位点的功能进行研究。实验拟采用原核表达系统，获得高效表达的GCRV外衣壳蛋白VP5及与包涵体形成相关的非结构蛋白NS80，免疫动物，制备特异抗体。通过定点突变技术，对VP5自动裂解位点的编码序列进行突变，并在杆状病毒中表达VP5蛋白突变体（VP5N42mu）。将体外表达的外衣壳蛋白VP5突变体（VP5N42mu）和野生型VP7蛋白（VP7wt）与纯化的GCRV核衣壳组装成突变型重构GCRV颗粒（VP5mur-GCRV）。利用免疫荧光及流式细胞等分析技术，比较突变型VP5mur-GCRV与野生型VP5wtr-GCRV重组病毒的细胞感染与蛋白合成等特性差异，揭示VP5N42功能位点的变异对病毒组装与感染特性的影响，为进一步揭示VP5蛋白在病毒侵染过程中致病的分子机理提供依据。

结项摘要

项目成果

期刊论文数量（4）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Building and Refining Protein Models within Cryo-electron Microscopy Density Maps Based on Homology Modeling and Multi-scale Structure Refinement
基于同源建模和多尺度结构细化在冷冻电子显微镜密度图中构建和细化蛋白质模型
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    Journal of Molecular Biology
  • 影响因子：
    5.6
  • 作者：
    方勤
  • 通讯作者：
    方勤
Functional investigation of grass carp reovirus nonstructural protein NS80.
草鱼呼肠孤病毒非结构蛋白NS80的功能研究
  • DOI：
    10.1186/1743-422x-8-168
  • 发表时间：
    2011-04-14
  • 期刊：
    Virology journal
  • 影响因子：
    4.8
  • 作者：
    Cai L;Sun X;Shao L;Fang Q
  • 通讯作者：
    Fang Q
Antibodies against outer-capsid proteins of grass carp reovirus expressed in E. coli are capable of neutralizing viral infectivity.
针对大肠杆菌中表达的草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白的抗体能够中和病毒感染性
  • DOI：
    10.1186/1743-422x-8-347
  • 发表时间：
    2011-07-12
  • 期刊：
    Virology journal
  • 影响因子：
    4.8
  • 作者：
    Shao L;Sun X;Fang Q
  • 通讯作者：
    Fang Q
3.3 Å Cryo-EM Structure of a Nonenveloped Virus Reveals a Priming Mechanism for Cell Entry
3.3 — 无包膜病毒的冷冻电镜结构揭示了进入细胞的启动机制
  • DOI：
    10.1016/j.cell.2010.03.041
  • 发表时间：
    2010-04-30
  • 期刊：
    CELL
  • 影响因子：
    64.5
  • 作者：
    Zhang, Xing;Jin, Lei;Zhou, Z. Hong
  • 通讯作者：
    Zhou, Z. Hong

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其他文献

利用抗草鱼IgM的单链抗体分析草鱼呼肠孤病毒的免疫原性
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    中国科学:生命科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    汪亚平;郭琼林;方勤;戴和平
  • 通讯作者：
    戴和平
新生小鼠耳蜗基底膜的取材培养技术
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2022
  • 期刊：
    听力学及言语疾病杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    卢顺兰;何金玲;莫伟坚;唐安洲;谭颂华;刘磊;方勤;谢利红
  • 通讯作者：
    谢利红

其他文献

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方勤的其他基金

草鱼呼肠孤病毒感染过程中调控宿主应激颗粒形成的分子机制
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    35.0 万元
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  • 批准年份：
    2001
  • 资助金额：
    17.0 万元
  • 项目类别：
    面上项目
草鱼出血病病毒RNA聚合酶的基因克隆和序列分析
  • 批准号：
    39570035
  • 批准年份：
    1995
  • 资助金额：
    9.0 万元
  • 项目类别：
    面上项目

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  • 项目类别：
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相似海外基金

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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