2447nt-489nt乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白与肝细胞蛋白相互作用研究

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30970163
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    35.0万
  • 负责人：
    林旭
  • 依托单位：
    福建医科大学
  • 学科分类：
    C0107.病毒学
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

2447nt-489nt乙型肝炎病毒（HBV）剪接变异体在慢性乙型肝炎患者中大量存在，其编码的剪接特异性蛋白HBSP与致病性密切相关,但确切机制不明。本研究在已完成HBSP酵母双杂交筛选与初步验证的基础上，首先以免疫共沉淀、细胞双杂交及激光共聚焦等方法再次验证HBSP与三种肝细胞蛋白(即FGG、EPHX1、CTSB)的相互作用，并确定HBSP功能区域；随后研究HBSP对FGG、EPHX1及CTSB相关功能的影响，并以此综合评价HBSP的致病性，其中包括FGG相关的凝血及血小板凝集过程，EPHX1相关的肝脏微粒体酶对化学致癌物的解毒功能，CTSB相关的肝癌细胞株侵袭能力及肿瘤坏死因子α介导的细胞凋亡。本研究将深化对HBV剪接变异体致病机制的认识，为发展更为有效的HBV防治手段提供新思路。

结项摘要

本研究旨在探讨2447nt-489nt乙型肝炎病毒（HBV）剪接变异体编码的剪接特异性蛋白HBSP的致病性。我们首先以GST-pull down、免疫共沉淀、哺乳动物细胞双杂交及激光共聚焦等方法确定HBSP与组织蛋白酶B（cathepsin B，CTSB)、微粒体环氧化物水解酶（microsomal epoxide hydrolase 1, mEH或EPHX1)及纤维蛋白原γ链（fibrinogen gamma chain ，FGG)存在相互作用，并且这种相互作用通过HBSP 蛋白N端47个氨基酸介导。我们随后研究了HBSP与这些细胞蛋白相互作用导致的生物学效应。结果表明：1. HBSP与FGG相互作用可干扰机体的凝血，是肝病患者具有出血倾向的原因之一；2. HBSP通过与CTSB的相互作用促进肝癌细胞株侵袭和迁移，从而增强肝癌细胞株的侵袭能力；3. 证实HBSP在体外能促进肝微粒体中mEH活性，加速苯并比（B[a]P）的代谢率并增加最终的致癌产物BPDE，提示HBSP可增加苯并比的致癌性。本研究证实HBSP具有多方面的重要的致病性，这对于更为全面深入了解HBV的致病性具有积极意义。

项目成果

期刊论文数量（4）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Hepatitis B Spliced Protein (HBSP) Generated by a Spliced Hepatitis B Virus RNA Participates in Abnormality of Fibrin Formation and Functions by Binding to Fibrinogen gamma Chain
乙型肝炎病毒RNA剪接产生的乙型肝炎剪接蛋白(HBSP)通过与纤维蛋白原γ链结合参与纤维蛋白形成和功能的异常
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    Journal of Medical Virology
  • 影响因子：
    12.7
  • 作者：
    Chen, Jin-Yan;Chen, Wan-Nan;Liu, Ling-Ling;Lin, Wan-Song;Jiao, Bo-Yan;Wu, Yun-Li;Lin, Jian-Yin;Lin, Xu
  • 通讯作者：
    Lin, Xu
Hepatitis B doubly spliced protein, generated by a 2.2 kb doubly spliced hepatitis B virus RNA, is a pleiotropic activator protein mediating its effects via activator protein-1-and CCAAT/enhancer-binding protein-binding sites
乙型肝炎双剪接蛋白由 2.2 kb 双剪接乙型肝炎病毒 RNA 生成，是一种多效性激活蛋白，通过激活蛋白 1 和 CCAAT/增强子结合蛋白结合位点介导其作用
  • DOI：
    10.1099/vir.0.022517-0
  • 发表时间：
    2010-10-01
  • 期刊：
    JOURNAL OF GENERAL VIROLOGY
  • 影响因子：
    3.8
  • 作者：
    Chen, Wan-Nan;Chen, Jin-Yan;Lin, Xu
  • 通讯作者：
    Lin, Xu
酵母双杂交筛选与单剪接型2.2 kb乙型肝炎病毒剪接特异性新蛋白相互作用的肝细胞蛋白
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中华微生物学和免疫学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    陈婉南;LIN Xu;陈金烟;黄清玲;林建银;林旭;CHEN Wan-nan;CHEN Jin-yan;HUANG Qing-ling;LIN Jian-yin
  • 通讯作者：
    LIN Jian-yin
Interaction of Hepatitis B spliced protein (HBSP) with cathepsin B promotes hepatoma cell migration and invasion.
乙型肝炎剪接蛋白（HBSP）与组织蛋白酶 B 的相互作用促进肝癌细胞迁移和侵袭。
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    Journal of Virology
  • 影响因子：
    5.4
  • 作者：
    Chen, Wan-Nan;Chen, Jin-Yan;Jiao, Bo-Yan;Lin, Wan-Song;Wu, Yun-Li;Liu, Ling-Ling;Lin, Xu
  • 通讯作者：
    Lin, Xu

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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