一个新的钙调氯离子通道蛋白CLCA4的功能研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    30971566
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    32.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    C0602.基因表达及非编码序列调控
  • 结题年份:
    2012
  • 批准年份:
    2009
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

人类和其它哺乳动物启动分娩的确切分子机制尚未明了,临床上至今没有能控制胎儿早产而无严重副作用的药物。我们运用DNA芯片技术观察了大鼠子宫平滑肌从妊娠中期到分娩前后8700个基因在mRNA水平上的表达谱,从一个功能未知的EST得到cDNA全长3.3kb、编码923个氨基酸的新基因,属于CLCA家族的新成员,我们命名为CLCA4。CLCA4是一个膜蛋白,在大鼠子宫平滑肌和肺部大量表达。电生理研究发现CLCA4具备钙离子依赖氯离子通道的典型特征。我们计划在前期研究的基础上对CLCA4进行系统的基因突变修饰,确定CLCA4维持氯离子通道特性的基本和关键结构。同时制备单克隆抗体研究CLCA4在不同组织中表达分布,评价该基因在大鼠分娩过程中的地位和作用,进而克隆人类平滑肌的同源基因并研究其生理生化特性。本研究有助于阐明CLCA4是否能够成为人为干预分娩过程的有效药物分子靶点。

结项摘要

分娩的机制非常复杂,至今对于分娩过程和分娩调控的分子机制还不甚了解。在搜索参与调节子宫收缩的研究中,我们从怀孕大鼠子宫中克隆了一个新的钙离子激活的氯离子通道调节基因,命名为大鼠CLCA4。CLCA家族蛋白已经被证实与分泌系统失调的疾病相关,其中包括囊肿性纤维化和哮喘。CLCA家族蛋白可以调节内源性的氯离子传导。在本研究中,我们制备了大鼠CLCA4的特异性的多克隆抗体。体外的过表达实验表明rCLCA4存在翻译后的剪切和糖基化的修饰。我们得到了rCLCA4在人类和小鼠的直向同源基因hCLCA4和mCLCA7,并且证实这两个基因也存在在翻译后的剪切和糖基化的修饰。已有研究表明CLCA家族蛋白具备金属蛋白酶的活性。我们构建了三个CLCA4基因的HEXXH锌离子结合氨基酸基序突变的载体进行体外过表达,随后的实验结果表明突变的蛋白的翻译后剪切效率降低。该结果证明了三个CLCA4基因的具备金属蛋白酶的活性。本研究有助于彻底阐明大鼠CLCA4及其直向同源基因的功能。

项目成果

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专著数量(0)
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会议论文数量(0)
专利数量(0)

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其他文献

利用SSH方法筛选与鉴定AC3基因缺失小鼠主要嗅觉表皮内的差异表达基因
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
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    遗传
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    李永超;Daniel R. Storm;马润林;王振山
  • 通讯作者:
    王振山

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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