EV71病毒非结构蛋白2A的功能及作用机制研究

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81171577
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    58.0万
  • 负责人：
    刘万红
  • 依托单位：
    武汉大学
  • 学科分类：
    H2102.消化道病毒、小RNA病毒与感染
  • 结题年份：
    2015
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2015-12-31

项目摘要

EV71(Enterovirus 71)急性感染可引起手足口病及中枢神经系统损害，严重可导致死亡，其感染和流行已成为危害人类健康的重大社会问题。EV71病毒非结构蛋白2A具有蛋白酶活性，是转录激活因子，在病毒感染和复制中具有重要功能，但其调控方式及作用机制目前尚不十分清楚。我们前期工作通过酵母双杂交筛选出EV71-2A的互作蛋白- - RASSF4蛋白，且GST-Pull down实验初步证实了它们的相互作用。本项目将利用荧光共定位、序列突变分析等多种方法进一步确证它们的相互作用及结合位点，利用蛋白酶活性分析、转录活性分析、RNA分析、Western blotting和RT-PCR等探索EV71-2A与RASSF4相互作用对病毒感染、病毒RNA稳定、复制等功能的影响。本项目的完成将对探索EV71-2A蛋白新功能、以及揭示新的EV71病毒感染分子机制、为抗病毒治疗提供理论依据等都具有重要意义。

结项摘要

EV71(Enterovirus 71)急性感染可引起手足口病及中枢神经系统损害，严重可导致死亡，其感染和流行已成为危害人类健康的重大社会问题。EV71 病毒非结构蛋白2A 具有蛋白酶活性，是转录激活因子，在病毒感染和复制中具有重要功能，但其调控方式及作用机制目前尚不十分清楚。我们前期工作通过酵母双杂交筛选出EV71-2A 的互作蛋白—RASSF4 蛋白，且GST-Pull down 实验初步证实了它们的相互作用。本项目我们利用荧光共定位、序列突变分析等多种方法进一步确证了它们的相互作用及结合位点，利用蛋白酶活性分析、转录活性分析、RNA 分析、Western blotting 和RT-PCR 等探索了EV71-2A 与RASSF4 相互作用对病毒感染、病毒RNA 稳定、复制等功能的影响。结果显示，EV71-2A蛋白酶活性抑制了外源性RASSF4在细胞中的表达，其作为转录激活因子促进细胞中内源性RASSF4的转录，从而促进内源性RASSF4的表达。在EV71病毒感染的晚期阶段，EV71抑制pAKT，而且RASSF4通过增加EV71复制和病毒滴度使得抑制pAKT的作用时间提前，RASSF4对EV71的这种作用是依赖于RASSF4作用于病毒进入宿主细胞后完成的。本项目的完成对探索EV71-2A 蛋白新功能、以及揭示新的EV71 病毒感染分子机制、为抗病毒治疗提供理论依据等都具有重要意义。

项目成果

期刊论文数量（23）
专著数量（0）
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  • DOI：
    10.1016/j.ajogmf.2020.100161
  • 发表时间：
    2020-06-20
  • 期刊：
    American Journal of Obstetrics & Gynecology Mfm
  • 影响因子：
    6.3
  • 作者：
    Breslin N;Baptiste C;Gyamfi-Bannerman C;Miller R
  • 通讯作者：
    Miller R
Different types of toxins targeting TRPV1 in pain
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  • DOI：
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  • 发表时间：
    2013-09-01
  • 期刊：
    TOXICON
  • 影响因子：
    2.8
  • 作者：
    Min, Jia-Wei;Liu, Wan-Hong;Peng, Bi-Wen
  • 通讯作者：
    Peng, Bi-Wen
泡沫病毒Gag蛋白的研究进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    生命的化学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李治;孙燕;刘万红;何小华
  • 通讯作者：
    何小华
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  • DOI：
    10.3892/ijmm.2013.1335
  • 发表时间：
    2013-06-01
  • 期刊：
    INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR MEDICINE
  • 影响因子：
    5.4
  • 作者：
    Lu, Jinzhi;Chen, Xiong;He, Xiaohua
  • 通讯作者：
    He, Xiaohua
Prokaryotic expression and polyclonal antibody production of transactivator Tas for potential application in detection of human foamy virus infection
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  • DOI：
    10.5897/ajmr11.1352
  • 发表时间：
    2012-02-23
  • 期刊：
    AFRICAN JOURNAL OF MICROBIOLOGY RESEARCH
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Qiu, Yanyan;Zhu, Guoguo;He, Xiaohua
  • 通讯作者：
    He, Xiaohua

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
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          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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