茚虫威抗性小菜蛾para通道基因分子克隆及功能分析

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30971936
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    36.0万
  • 负责人：
    周小毛
  • 依托单位：
    湖南农业大学
  • 学科分类：
    C1405.植物化学保护
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

本研究拟在前期研究的基础上，将以本实验室汰选的茚虫威抗性小菜蛾品系（RR 310左右）为供试材料，采用分子生物学技术和双电极电压钳技术研究敏感和茚虫威抗性品系小菜蛾para通道的分子差异及其对药理性质的影响，旨在找出与抗性相关的突变位点，明确小菜蛾对茚虫威的靶标抗性的分子机理，从而在分子水平上对抗性进行早期预警，为抗性治理提供更精确信息。同时了解para通道不敏感性对其它药剂结合位点的影响，即para通道的药理性质是否改变，有利于阐明不同药剂之间的交互或负交互抗性的分子机制，并从抗性角度设计新杀虫剂的分子结构及其构型提供直接依据。

结项摘要

以本实验室汰选的茚虫威抗性小菜蛾品系（RR 455）为供试材料，采用RT-PCR结合Race技术克隆了敏感和茚虫威抗性品系小菜蛾para通道基因，通过比对，发现抗性品系para通道基因核苷酸发生了6个碱基的变化，分别为第50位的A→G，53位的C→A，74位的C→A，194位的C→A，2400位的A→G，2427位的T→C。进一步比对氨基酸序列，其中有3个位点的核苷酸的变化导致了氨基酸发生了替换，分别为第64位氨基酸D→E，800位的氨基酸K→E，809位的氨基酸Y→H。经与跨膜预测结构比对发现，其中800位的氨基酸K→E，809位的氨基酸Y→H替换均位于跨膜区，第64位氨基酸D→E替换不在跨膜区。而后构建了小菜蛾para通道基因表达载体，并成功在爪蟾卵母细胞中表达抗性和敏感品系的para通道基因，采用双电极电压钳技术测定茚虫威和DCJW稀释液灌注对卵母细胞电流的变化数值，结果为敏感和抗性para亚基茚虫威与产生电流反应之间的方程式为y=1.5800x+4.4580(R2=0.7354)；y=1.9760x+5.8380(R2=0.9828)敏感和抗性para亚基对茚虫威的EC50值分别为1.51×10－3M，1.11×10－3M，差异不大。敏感和抗性para亚基DCJW与产生电流反应之间的方程式为y=1.004x+6.958(R2=0.9829)；y=1.014x+7.018(R2=9845)。敏感和抗性para亚基对DCJW的EC50值分别为1.17×10－7M，1.20×10－7M，差异也不大。同时以小菜蛾para通道基因为依据，采用分子设计结合计算机辅助设计并合成了50多个化合物，经生物测定发现3个化合物具有开发的潜力。

项目成果

期刊论文数量（2）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Asymmetric synthesis of 2-alkyl-3-phosphonopropanoic acid derivatives via Rh-catalyzed asymmetric hydrogenation
Rh催化不对称氢化不对称合成2-烷基-3-膦酰基丙酸衍生物
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  • 发表时间：
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  • 期刊：
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  • 影响因子：
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  • 作者：
    Li-bin Luo;Dao-yong huang;Xiao-mao Zhou;Zhuo Zheng;Xiang-ping Hu
  • 通讯作者：
    Xiang-ping Hu
茚虫威对不同抗药性品系小菜蛾呼吸代谢的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    应用昆虫学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    侯建虎;周小毛;柏连阳;罗梨宾;刘佳
  • 通讯作者：
    刘佳

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  • 通讯作者：
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    2016
  • 期刊：
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  • 作者：
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  • 通讯作者：
    周小毛
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  • 通讯作者：
    周小毛
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  • 发表时间：
    2017
  • 期刊：
    湖南农业科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王赞永;周勇;马海昊;刘佳;朱航;邓希乐;谭辉华;周小毛
  • 通讯作者：
    周小毛

其他文献

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周小毛的其他基金

茚虫威抗性小菜蛾ABCC2蛋白基因功能分析
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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