刺五加有效组分对转染α-Syn的 SH-SY5Y细胞调控及机制研究

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81073019
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    32.0万
  • 负责人：
    刘树民
  • 依托单位：
    黑龙江中医药大学
  • 学科分类：
    H3203.中药药效物质
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

前期研究已确定刺五加治疗帕金森病（PD）的有效组分及其初步药效机制。本课题将采用基因转染技术，以慢病毒为载体，构建人野生型和A53T突变型α-突触核蛋白（α-Syn）的病毒转染系统，转染人神经母细胞瘤细胞株（SH-SY5Y），同时以鱼藤酮为体外毒素，致SH-SY5Y细胞的损伤，建立稳定表达的PD细胞模型。应用流式细胞术、RT-PCR和Western blotting等技术手段，从影响细胞凋亡、信号转导通路、蛋白酶体途径、PD相关蛋白等角度，研究刺五加有效组分对未转染和转染α-Syn的SH-SY5Y细胞的调控作用及其内在机制。另外本课题研究将引入蛋白质组学方法，从整体上定性和定量检测刺五加有效组分处理后细胞内蛋白质分子的变化，对在蛋白质水平探讨药物作用机制及寻找新药靶点有重要意义。本研究将为刺五加开发为作用靶标明确、拥有自主知识产权、安全有效的治疗帕金森病的中药新药奠定基础。

结项摘要

本研究在前期研究工作的基础上，采用基因转染技术，以慢病毒为载体，构建人野生型和 A53T 突变型α-突触核蛋白（α-Syn）的病毒转染系统，转染人神经母细胞瘤细胞株（SH-SY5Y），建立稳定转染的PD细胞模型。应用流式细胞术、RT-PCR和 Western blotting 等技术手段，从影响细胞凋亡、胰岛素信号通路、PD 相关蛋白等角度，研究了刺五加有效组分对未转染和转染α-Syn 的SH-SY5细胞的调控作用及其作用机制。另外本课题研究引入蛋白质组学方法，定性和定量地检测了刺五加有效组分处理后细胞内蛋白质分子的变化，找出了野生型和 A53T 突变型α-Syn转染后，细胞中差异表达的蛋白，并以它们为潜在生物标志物来探讨刺五加有效组分对这两个模型干预作用，对在蛋白质水平探讨药物作用机制及寻找新药靶点有重要意义。

项目成果

期刊论文数量（7）
专著数量（0）
科研奖励数量（1）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Neuroprotective effects of extract of Acanthopanax senticosus harms on SH-SY5Y cells overexpressing wild-type or A53T mutant - synuclein
刺五加提取物对过表达野生型或A53T突变体的SH-SY5Y细胞的神经保护作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    Phytomedicine
  • 影响因子：
    7.9
  • 作者：
    Xu-zhao Li;Shuai-nan Zhang;Ke-xin Wang;Hong-yu Liu;Zhi-ming Yang;Shu-min Liu;Fang Lu
  • 通讯作者：
    Fang Lu
帕金森病致病基因的研究进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国老年学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    卢芳;周世慧;刘树民
  • 通讯作者：
    刘树民
帕金森病体外细胞模型的研究进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    实验动物与比较医学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    范振群;刘树民;周世慧;王可心
  • 通讯作者：
    王可心
刺五加提取物对高表达野生型或A53T突变型-synuclein的SH-SY5Y细胞的神经保护作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    科技论文在线
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李煦照;王可心;张帅男;杨智明;刘洪毓;卢芳;刘树民
  • 通讯作者：
    刘树民
帕金森病相关microRNA的研究进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    中国科技论文在线
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    潘思文;卢芳
  • 通讯作者：
    卢芳

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  • 通讯作者：
    刘树民

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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