肠道病毒71型衣壳蛋白与受体蛋白SCARB2和PSGL-1作用位点的确定及其阻断剂的筛选

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31070147
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    33.0万
  • 负责人：
    吕颂雅
  • 依托单位：
    武汉大学
  • 学科分类：
    C0107.病毒学
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

肠道病毒71型（EV71）是手足口病的主要病原体，近年来在我国各地都有感染病例，在某些地区婴幼儿中大爆发，引起极大恐慌。EV71的两种细胞受体SCARB2和PSGL-1已于2009年被发现。病毒蛋白与细胞受体间的相互作用是启动病毒感染的第一步，关系到病毒感染细胞的入侵机制及病毒入侵的药物靶点。本项目拟通过酵母双杂交或免疫共沉淀技术从EV71四种衣壳蛋白中筛选出能与上述两种受体蛋白互作的衣壳蛋白，并通过构建衣壳蛋白缺失突变，进一步明确衣壳蛋白与受体蛋白的关键作用位点，然后通过流式细胞、激光共聚焦等技术证实衣壳蛋白在细胞膜上与受体蛋白的相互结合。最后以病毒衣壳蛋白上与两种受体蛋白发生相互作用的肽段或该衣壳蛋白本身为诱饵，通过15肽库和 RNA适配子随机文库，筛选与目标肽段相互作用的短肽或RNA适配子，以此阻断病毒蛋白-受体间的相互作用，达到抑制病毒感染的目的，并可能开发为病毒诊断试剂。

结项摘要

本课题在2009年2个EV71受体被发现的基础上提出，打算研究EV71衣壳蛋白与EV71两受体间的相互作用位点。项目执行3年来，我们采用酵母双杂交、免疫共沉淀技术进行研究，已经发现了衣壳蛋白VP1的第304-582碱基所对应的氨基酸能够与PSGL-1结合。受本基金资助，我们完成了2株手足口病毒临床株的全序列测定，经序列对比鉴定为EV71-C4和CoxA16病毒株；我们用杆状病毒MultiBac系统，构建了EV71 VLP，并用VLP开发了EV71单克隆中和抗体；我们原核表达了EV71的8个蛋白VP1-4和2A,2C,3C,3D并成功制备了VP1的多克隆抗体，其他蛋白抗体在进一步制备中，为进一步研究这些蛋白的功能奠定基础；我们正在通过质谱分析研究EV71蛋白与宿主细胞的相互作用，以了解病毒的感染机制。受本基金资助，已发表一篇学术论文，并有1名博士和3名硕士顺利毕业。

项目成果

期刊论文数量（1）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Complete genome sequence of a human enterovirus 71 strain isolated in wuhan, china, in 2010.
2010 年在中国武汉分离的人类肠道病毒 71 株的完整基因组序列
  • DOI：
    10.1128/genomea.01112-13
  • 发表时间：
    2013-12-26
  • 期刊：
    Genome announcements
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Yang Z;Lu S;Xian J;Ye J;Xiao L;Luo J;Zen K;Liu F
  • 通讯作者：
    Liu F

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其他文献

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棉铃虫核型多角体病毒（HaSNPV）侵染机制的研究
  • 批准号：
    30570082
  • 批准年份：
    2005
  • 资助金额：
    26.0 万元
  • 项目类别：
    面上项目

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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