SGK-1在ALI肺泡上皮差异性表达及对ENaC表达调控研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
30971303
项目类别：
面上项目
资助金额：
31.0万
负责人：
王导新
依托单位：
重庆医科大学
学科分类：
H0109.急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征
结题年份：
2012
批准年份：
2009
项目状态：
已结题
起止时间：
2010-01-01 至2012-12-31

项目参与者：
张婷；李升锦；张维；李长毅；童谨；黄斌；邓旺；
关键词：
ALI/ARDS SGK-1 肺泡水肿液清除上皮细胞钠离子通道

项目摘要

肺泡水肿液聚集是ALI/ARDS的重要病理特征，肺泡水肿液清除（AFC）能力直接关乎ALI/ARDS的预后，上皮钠离子通道（ENaC）是AFC的关键环节。上调ENaC的表达将可能改善ALI/ARDS的预后。研究表明激活血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1（SGK-1）可以在肾小管上皮、内耳上皮等上调ENaC亚基的表达，影响水钠代谢。因此SGK-1可能在调节ENaC介导的肺水吸收和清除中起重要作用。为验证这一假说，我们在体内外试验中检测差异性表达的SGK-1对BALB/c小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞ENaC各亚基表达和对LPS所致小鼠ALI模型AFC能力的影响，并通过SGK-1基因敲出小鼠验证SGK-1在胰岛素对肺泡上皮细胞钠离子通道亚基蛋白表达调控中的关键性，以及激活SGK-1在体内对肺泡水肿液清除的促进作用，为进一步研究ALI/ARDS的发病机制和治疗做一些有意义的探索。

结项摘要

肺泡水肿液清除能力关乎ALI/ARDS预后，上皮钠离子通道是AFC的关键环节。在体外实验中，通过以人肺腺癌细胞系A549细胞为对象研究胰岛素作用下肺泡上皮细胞钠离子通道α亚基（ENaC-α）的变化及其对细胞凋亡影响。我们发现胰岛素可以通过PKC，SGK-1途径上调肺泡上皮细胞钠离子通道（ENaC）的关键亚基，ENaC-α的表达；胰岛素可以降低由缺氧诱导的A549细胞的凋亡，起到一定的细胞保护作用。在体内试验中，通过脂多糖建立大鼠肺损伤模型，我们发现：使用胰岛素处理后LPS诱导的大鼠肺损伤模型，血清中炎症介质明显减低，说明胰岛素具有一定的抗炎作用；使用胰岛素处理后LPS诱导的大鼠肺损伤模型病理切片及评分显示，较模型组有明显的好转，说明胰岛素对ALI/ARDS有一定的治疗作用；使用胰岛素处理后LPS诱导的大鼠肺损伤模型的肺湿干重比有明显改善，说明胰岛素有可能通过上调钠离子通道的表达，起到一定的促进肺水肿清除的作用；使用胰岛素处理后LPS诱导的大鼠肺损伤模型的肺组织内上皮细胞钠离子通道各亚基表达增加，且与SGK-1表达呈一致性，胰岛素可能通过SGK-1途径上调ENaC的表达。本研究证明了胰岛素减轻肺水肿的具体机制，对临床应用胰岛素治疗ALI/ARDS患者奠定了理论基础，在国内外同类研究中具有一定的创新和突破性，发表SCI论文多篇。