大鼠急性高眼压视网膜大胶质细胞死亡的RIPK-3通路及其调控机制研究

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基本信息

  • 批准号：
    81070729
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    35.0万
  • 负责人：
    黄菊芳
  • 依托单位：
    中南大学
  • 学科分类：
    H1304.青光眼、视神经及视路疾病
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

前期研究发现大鼠急性高眼压1天时部分视网膜大胶质细胞出现死亡，但机制不明。视网膜基因芯片、RT-PCR等显示该模型条件下视网膜中部分大胶质细胞RIPK-3表达上调。鉴于RIPK-3- - -代谢紊乱- - -ROS聚集是非Caspase-依赖性细胞死亡的重要通路并受Caspase-8剪切调控，我们推测急性高眼压早期视网膜大胶质细胞的死亡可能由RIPK-3介导并受Caspase-8调控。为证明该假设，我们拟通过体内和体外实验探索RIPK-3通路在急性高眼压后大胶质细胞凋亡过程中的作用，继而探索Caspase-8对RIPK-3的剪切调控作用。本项目以急性高眼压视网膜大胶质细胞存亡的分子机制为突破口，有利于进一步探索视网膜大胶质细胞对节细胞死亡的影响，为青光眼病程中保护受损的大胶质细胞，继而保护节细胞提供理论和实验依据。

结项摘要

RIP3是具有特异丝氨酸/苏氨酸激酶活性的一类蛋白，其能够感受细胞内环境的变化从而调控细胞的坏死，急性高眼压1天时部分视网膜大胶质细胞出现坏死，因此保护损伤的胶质细胞进而保护神经元成为我们研究的重点。为了解决这一问题，我们首先对RIP3在大鼠视网膜内的表达分布进行了研究，结果发现RIP3主要表达在视网膜内层神经元中，包括大部分的节细胞以及少部分的水平细胞和无长突细胞，只有部分胶质细胞中有所表达，且未在其他类型的细胞中发现明显表达。这使得我们更多地将目光聚焦到眼高压1天之后节细胞的坏死上来，为了进一步研究其坏死机制，我们运用免疫荧光与western blot等方法检测了急性眼高压后大鼠视网膜RIP3的表达变化，结果发现，急性高眼压后1天视网膜节细胞RIP3分布规律未见明显变化，但其表达量显著上调，进一步研究发现RIP3上调的部分节细胞中有存在坏死，RIP3的表达上调与节细胞的坏死密切相关。利用离体条件下加压损伤研究程序性坏死可能分子机制，同样发现RIP3在此细胞系高压损伤导致的程序性坏死中发挥作用，并且发现除了RIP3在次过程中起作用之外，calpain也在此细胞系中介导程序性坏死，这很大程度的丰富了程序性坏死的机制研究。

项目成果

期刊论文数量（8）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（6）
专利数量（0）
脑神经元死亡的研究进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    中国现代医学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    黄菊芳;李岚;尚蕾;熊鲲;HUANG Ju-fang,LI Lan,SHANG Lei,XIONG Kun(Departmen
  • 通讯作者：
    HUANG Ju-fang,LI Lan,SHANG Lei,XIONG Kun(Departmen
一种改良型的免疫印迹法
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    现代生物医学进展
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    尚蕾;黄铠;曹妍群;黄菊芳
  • 通讯作者：
    黄菊芳
RIP3及其生物学功能研究进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    中国细胞生物学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    尚蕾;熊鲲;王慧;黄菊芳
  • 通讯作者：
    黄菊芳
Expression of Glutamate and GABA during the Process of Rat Retinal Synaptic Plasticity Induced by Acute High Intraocular Pressure.
急性高眼压致大鼠视网膜突触可塑性过程中谷氨酸和GABA的表达
  • DOI：
    10.1267/ahc.12029
  • 发表时间：
    2013-02-28
  • 期刊：
    Acta histochemica et cytochemica
  • 影响因子：
    2.4
  • 作者：
    Zhou L;Huang J;Wang H;Luo J;Zeng L;Xiong K;Chen D
  • 通讯作者：
    Chen D
Timosaponin-BII inhibits the up-regulation of BACE1 induced by ferric chloride in rat retina.
知母皂苷-BII抑制氯化铁诱导的大鼠视网膜BACE1上调
  • DOI：
    10.1186/1472-6882-12-189
  • 发表时间：
    2012-10-22
  • 期刊：
    BMC complementary and alternative medicine
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Huang JF;Shang L;Liu P;Zhang MQ;Chen S;Chen D;Fan CL;Wang H;Xiong K
  • 通讯作者：
    Xiong K

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  • 通讯作者：
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
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技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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