树突状细胞和调节性T细胞共同介导的乳酸菌抗结肠炎作用免疫机制研究
项目介绍
AI项目解读
基本信息
- 批准号:81170358
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:14.0万
- 负责人:
- 依托单位:
- 学科分类:H0302.消化系统免疫相关疾病
- 结题年份:2012
- 批准年份:2011
- 项目状态:已结题
- 起止时间:2012-01-01 至2012-12-31
- 项目参与者:胡静涛; 杨文涛; 杜金粉; 孟菲; 石春卫; 赵葛; 石少华; 王怡君; 郭晓敏;
- 关键词:
项目摘要
乳酸菌作为益生菌,在防治炎症性肠病(IBD)和保障人类健康方面具有重要的生理作用和潜在应用价值,但其如何调解机体免疫系统的机制尚不明确。鉴于此,本研究应用已经筛选的具有抗炎活性的乳酸菌干预正常小鼠,采用免疫磁珠法分离肠系膜淋巴结中CD11c+树突状细胞应用流式细胞术、荧光定量PCR等方法研究乳酸菌诱导DCs亚群的分化与发育以及分化的DCs亚群对Tregs发育的影响;应用乳酸菌干预三硝基苯磺酸诱导的小鼠结肠炎模型和CD4+CD45RBhighT细胞过继性转入SCID小鼠诱导的慢性结肠炎模型,采用流式细胞术、免疫荧光技术等研究Tregs在小鼠结肠炎模型中的免疫调节作用,阐明乳酸菌调节免疫系统发挥抗炎效应的分子作用机制,为进一步开发乳酸菌作为免疫调节剂预防IBD奠定理论基础。
结项摘要
本研究获得具有抗炎活性的混合乳酸菌Lactobacillus acidophilus ATCC 4356 +Lactobacillus rhamnosus GG ATCC 53103+Lactobacillus plantarum A,其中,ATCC4356、ATCC 53103购自美国模式培养物研究所,L.p A由本实验室从市售酸奶中分离得到,经过16s rDNA技术进行鉴定后,用于实验。体外筛选通过检测MLN与乳酸菌共培养后Foxp3、IL-10、IL-12等的表达,进行筛选;体内筛选通过检测不同组合的乳酸菌干预小鼠后MLN中CD4+CD25+Foxp3+Treg、IL-10、IL-12的表达进行筛选。另一方面,将筛选出的混合乳酸菌干预小鼠21d后,检测小鼠MLN和脾脏中CD11c+CD11b+CD8α+DC、CD11c+B220+CD8α+DC、CD80/CD86、CD40、MHC-II等技术指标,明确乳酸菌对体内树突状细胞亚群的分化、发育的作用;应用MACS分选乳酸菌作用后小鼠MLN中的DC,与MACS分选出的正常Balb/C小鼠的CD4+T细胞共培养,检测Th1型(IFN-γ)、Th2型(IL-4)、Th17(IL-17)型细胞因子,评价乳酸菌诱导的DC对Th细胞的极化作用,评价乳酸菌诱导的DC使得Th细胞向哪个方向极化。最后,将筛选出的混合乳酸菌干预小鼠21d后,检测CD4+CD25+Foxp3+Treg及相关因子,再用柠檬酸杆菌(Citrobacter rodentium ATCC 51459)干预乳酸菌作用后的小鼠,并检测CD4+CD25+Foxp3+Treg,IL-17、IFN-γ、TNF等相关细胞因子,截取小鼠远端结肠进行组织病理学检测,从分子水平和细胞水平阐明Treg对宿主免疫系统产生抗炎作用的机制。
项目成果
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专著数量(0)
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