树突状细胞和调节性T细胞共同介导的乳酸菌抗结肠炎作用免疫机制研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    81170358
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    14.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    H0302.消化系统免疫相关疾病
  • 结题年份:
    2012
  • 批准年份:
    2011
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2012-01-01 至2012-12-31

项目摘要

乳酸菌作为益生菌,在防治炎症性肠病(IBD)和保障人类健康方面具有重要的生理作用和潜在应用价值,但其如何调解机体免疫系统的机制尚不明确。鉴于此,本研究应用已经筛选的具有抗炎活性的乳酸菌干预正常小鼠,采用免疫磁珠法分离肠系膜淋巴结中CD11c+树突状细胞应用流式细胞术、荧光定量PCR等方法研究乳酸菌诱导DCs亚群的分化与发育以及分化的DCs亚群对Tregs发育的影响;应用乳酸菌干预三硝基苯磺酸诱导的小鼠结肠炎模型和CD4+CD45RBhighT细胞过继性转入SCID小鼠诱导的慢性结肠炎模型,采用流式细胞术、免疫荧光技术等研究Tregs在小鼠结肠炎模型中的免疫调节作用,阐明乳酸菌调节免疫系统发挥抗炎效应的分子作用机制,为进一步开发乳酸菌作为免疫调节剂预防IBD奠定理论基础。

结项摘要

本研究获得具有抗炎活性的混合乳酸菌Lactobacillus acidophilus ATCC 4356 +Lactobacillus rhamnosus GG ATCC 53103+Lactobacillus plantarum A,其中,ATCC4356、ATCC 53103购自美国模式培养物研究所,L.p A由本实验室从市售酸奶中分离得到,经过16s rDNA技术进行鉴定后,用于实验。体外筛选通过检测MLN与乳酸菌共培养后Foxp3、IL-10、IL-12等的表达,进行筛选;体内筛选通过检测不同组合的乳酸菌干预小鼠后MLN中CD4+CD25+Foxp3+Treg、IL-10、IL-12的表达进行筛选。另一方面,将筛选出的混合乳酸菌干预小鼠21d后,检测小鼠MLN和脾脏中CD11c+CD11b+CD8α+DC、CD11c+B220+CD8α+DC、CD80/CD86、CD40、MHC-II等技术指标,明确乳酸菌对体内树突状细胞亚群的分化、发育的作用;应用MACS分选乳酸菌作用后小鼠MLN中的DC,与MACS分选出的正常Balb/C小鼠的CD4+T细胞共培养,检测Th1型(IFN-γ)、Th2型(IL-4)、Th17(IL-17)型细胞因子,评价乳酸菌诱导的DC对Th细胞的极化作用,评价乳酸菌诱导的DC使得Th细胞向哪个方向极化。最后,将筛选出的混合乳酸菌干预小鼠21d后,检测CD4+CD25+Foxp3+Treg及相关因子,再用柠檬酸杆菌(Citrobacter rodentium ATCC 51459)干预乳酸菌作用后的小鼠,并检测CD4+CD25+Foxp3+Treg,IL-17、IFN-γ、TNF等相关细胞因子,截取小鼠远端结肠进行组织病理学检测,从分子水平和细胞水平阐明Treg对宿主免疫系统产生抗炎作用的机制。

项目成果

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专著数量(0)
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
    王春凤
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  • 发表时间:
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  • 期刊:
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  • 发表时间:
    2014
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猪白细胞介素 18 成熟蛋白基因的克隆与表达
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  • 影响因子:
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  • 通讯作者:
    王春凤

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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