内含子miRNA在转录和功能水平反馈调节主基因的研究

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基本信息

项目摘要

大约有25%的microRNA位于编码蛋白基因（主基因）的内含子中，但是目前还不清楚这些内含子microRNA是否或者怎样调控其主基因的功能。我们前期的研究建立了一个内含子miRNA对其主基因的反馈调节模型：miR-301可以在转录和功能水平反馈调控其主基因。根据进一步的生物信息学分析的数据，我们推断内含子miRNA反馈调节其主基因参与的生物过程在哺乳动物中是普遍存在的。本课题将从三个方面来证明这个假说。一是大规模的分析和证明内含子miRNA对其主基因mRNA表达水平的反馈调节；二是分析和证明内含子miRNA通过其靶基因反馈调节其主基因的机制；三是分析和证明内含子miRNA对主基因编码蛋白相互作用蛋白的直接或间接的调控作用。通过研究内含子miRNA反馈调节主基因的现象和机制，对揭示这类特殊的miRNA的功能和在生物体中的作用有着重要意义并能为这类miRNA的进化研究提供一定的依据。

结项摘要

在本项目资助下，我们发现miR-301靶向抑制MEOX2，从而保持MAPK-CREB活性，一方面可直接调节其宿主基因SKA2的表达，另一方面还可通过调控SKA1来帮助其功能的完成。而且这条miR-301反馈调节SKA2表达和功能的途径还与A549肺癌细胞的转移相关。初步证明内含子miRNA能够调控其宿主基因的表达和功能具有普遍性。.在完成上述研究工作的同时，我们对miRNA-200家族功能进行了研究，结果发现miRNA 200b可通过靶向RND3调节cyclin D1 的表达并促进HeLa细胞进入S期。MicroRNA-200b在临床子宫内膜癌中高表达并通过靶向TIMP2增强基质金属蛋白酶MMP2活性。提示MicroRNA-200b在子宫内膜癌的转移侵袭过程中具有重要作用。.我们研究还发现，RMND5A是miR-138的作用靶标，抑制RMND5A表达，将阻碍大多数pre-miRNA的出核转运，证明RMND5A的表达直接影响pre-miRNA出核的关键蛋白Exportin-5的稳定性。.另外，在本项目子资助下，有关Ku蛋白与miRNA成熟加工关系研究也还在进行，进展良好。.上述研究研究结果推深入了解内含子miRNA对其主基因反馈调节及miRNA产生机制具有重要意义。.相关研究结果已发表SCI论文（标注基金资助）3篇：.1）Cao G, et al.BBRC, 2010 ,396:978-982.2）Xia W, et al. Mol Cell Biochem, 2010, 2010, 344:261-266.3）Dai Yet al. Nucleic Acid Therapeutics 2012 DOI: 10.1089/nat.2012.0385.本项目申请并批准经费30万元已于2009年10月及2010年4月全部到位，到基金结题日期已经支出全部支出，主要用于实验材料的购买及测试费用。没有超过5万元以上的设备费支出。

项目成果

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
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          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
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          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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