肺炎嗜衣原体HSP10的致病作用及信号通路研究

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基本信息

  • 批准号：
    30901352
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    18.0万
  • 负责人：
    周洲
  • 依托单位：
    南华大学
  • 学科分类：
    H1104.炎症、感染与免疫
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

本研究采用细胞生物学技术研究肺炎嗜衣原体（Chlamydophila pneumoniae, Cpn）热休克蛋白10（Hsp10）在慢性感染性疾病中的致病作用。探讨Hsp10诱导宿主细胞分泌炎症因子的功能及其相关Toll样受体（TLR）和信号通路。构建相关受体和信号通路关键分子的细胞转染模型，分析TLR、ERK和NF-κB信号通路在介导Hsp10诱生宿主细胞炎症反应中的作用。并以重组蛋白进行动物毒性试验，检测BALB/c小鼠肺病理性改变、血标本及支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞炎症因子水平和T淋巴细胞亚群。本研究为进一步阐明Cpn的致病机制提供理论和实验依据。

结项摘要

本项目基本按照申请要求完成了各项检测指标。通过对CHSP10在体外诱导宿主细胞分泌前炎症细胞因子IL-6、IL-1β等功能的检测，以及ERK信号通路与NF-κB信号通路在CHSP10诱生炎症因子作用的研究，初步阐明了TLR2、TLR4与CHSPs诱生炎症因子及其炎症信号通路之间的关联，这对进一步明确Cpn的致病机制具有重要意义。通过成熟的分子克隆技术及蛋白纯化技术，获得了高纯度并无内毒素活性的CHSP10蛋白样品；发现CHSP10能在体外诱生宿主细胞分泌IL-6、IL-1β等前炎症细胞因子，并且CHSP10诱生前炎症因子的作用根据不同的蛋白剂量及不同刺激时间有所不同，说明CHSP10可能参与Cpn诱导的炎症反应。CHSP10在刺激宿主细胞后，能明显活化细胞的ERK通路，经分析显示在作用30min时活化通路的效果最强，这一点与病原体Cpn相似，而与LPS不同，且经通路抑制剂作用后，CHSP10不仅活化通路的作用大大减弱，其诱生炎症因子的水平也明显减少；CHSP10在作用60min后也能明显活化宿主细胞的NF-κB通路，经通路抑制剂作用后，其活化程度及诱生炎症因子的水平也明显降低，说明CHSP10能通过活化HUVEC的ERK和NF-κB信号通路诱生炎症因子。经质粒、报告基因共转染后，发现转染TLR2和/或TLR4后的实验组细胞经CHSP10刺激后均可显著上调磷酸化ERK的表达；而转染了TLR的实验组，经CHSP10刺激后可显著激活NF-κB信号通路，其中，共转染2种受体的实验组通路活化的程度要高于单项转染组，在单项转染组中，以TLR4介导激活NF-κB活化的作用强于TLR2，说明TLR2与TLR4不同程度地参与介导CHSP10激活ERK和NF-κB信号通路，释放炎症因子的过程。

项目成果

期刊论文数量（5）
专著数量（2）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（2）
专利数量（0）
肺炎嗜衣原体热休克蛋白10经TLR2及TLR4调控THP-1分泌TNF-α
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中华微生物学和免疫学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    周洲;杨科;陈丽丽;陈虹亮;李忠玉;吴移谋
  • 通讯作者：
    吴移谋
肺炎嗜衣原体热休克蛋白10促炎症作用及其机制的初步研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    免疫学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    周洲;陈丽丽;刘良专;李忠玉;游晓星;陈曦;吴移谋
  • 通讯作者：
    吴移谋
肺炎嗜衣原体CPAF原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中南医学科学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    周洲;吴移谋;陈丽丽;李忠玉;陈超群
  • 通讯作者：
    陈超群
Heat shock protein 10 of Chlamydophila pneumoniae induces proinflammatory cytokines through Toll-like receptor (TLR) 2 and TLR4 in human monocytes THP-1
肺炎衣原体热休克蛋白 10 通过人单核细胞 THP-1 中的 Toll 样受体 (TLR) 2 和 TLR4 诱导促炎细胞因子
  • DOI：
    10.1007/s11626-011-9441-4
  • 发表时间：
    2011-07
  • 期刊：
    In Vitro Cellular & Developmental Biology-Animal
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Zhou, Z.;Wu, Y.;Chen, L.;Liu, L.;Chen, H.;Li, Z.;Chen, C.
  • 通讯作者：
    Chen, C.

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  • 通讯作者：
    杨林安

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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