OPTIMIZATION OF MICROBIOLOGICAL ASSAY FOR FOLATE IN FOODS

食品中叶酸微生物测定的优化

基本信息

项目摘要

The overall objective of the proposed work is to optimize the methodology for folate analysis of food employing microbiological assay, by identifying improved procedures in various stages of the assay. The results obtained may lead to standardization of the analytical methodology for folate determination in foods and to stimulate further research that would increase the reliability and validity of food folate database. Accurate food-composition and intestinal-absorption data are essential to further our understanding of the bioavailability of food folate and to assess the human dietary folate requirements. Significant health benefits may also derive from update food folate information in light of the recently acknowledged roles of folate in neural tube defects, cardiovascular disease and cancer. There are three major steps in the microbiological assay for food folate: sample extraction, enzyme treatment and Lactobacillus casei assay. Variations in folate values of selected food items caused by varied conditions in each stage of the analysis will be quantified. The variables in the extraction procedures to be studied are: method of sample homogenization, extracting buffer used, ratio of sample to buffer, completeness of sample extraction, level of ascorbic acid added to buffer, heat treatment, pH adjustment of sample extract, method for clarification of sample extract, and storage stability of sample extract. In enzyme treatment of samples, the type and source of enzymes and conditions for incubation will be examined. Specific variables in the L. Casei assay to be investigated include the source and preparation of the calibrant, preparation of inoculum and culture medium, time and temperature of incubation, volume of sample extract to be assayed and the adaptation of microplate bioanalytical techniques for L. Casei assay. Additional specific objectives are to establish optimal conditions for sample analysis in selected food items and to determine if a general analytical procedure may be applicable to various types of food for folate determination. The final component of the proposed work focuses on the application of the refined analytical methodology to study the kinetics of folate destruction and the retention of folate during food preparation, processing and storage.
拟议工作的总体目标是优化 使用微生物学分析的食物分析的方法, 通过确定分析的各个阶段的改进程序。 这 获得的结果可能导致分析的标准化 食物中叶酸测定的方法并进一步刺激 研究将提高食物叶酸的可靠性和有效性 数据库。准确的食物组成和肠道吸收数据是 进一步了解食物的生物利用度至关重要 叶酸并评估人类饮食叶酸的要求。重要的 健康益处也可能来自更新食品叶酸信息 叶酸在神经管缺陷中的最近确认的作用, 心血管疾病和癌症。 有三个主要步骤 食品叶酸的微生物学测定:样品提取,酶处理 和乳杆菌壳分析。 所选叶酸值的变化 在分析的每个阶段,由各种条件引起的食物将 被量化。 要研究的提取程序中的变量 是:样品均质化,提取缓冲液的方法,比率 样品到缓冲,样品提取的完整性,抗坏血酸的水平 酸添加到缓冲液中,热处理,样品提取物的pH调节, 阐明样品提取物的方法和样品的存储稳定性 提炼。在样品的酶处理中,酶的类型和来源 将检查孵化条件。 特定变量 L. Casei测定法包括 校准剂,接种物和培养基的制备,时间和 孵育的温度,要测定的样品提取物的体积和 小乳杆菌测定法的微板生物分析技术的适应。 其他具体目标是建立最佳条件 选定食品中的样本分析,并确定是否一般 分析程序可能适用于各种类型的食物 叶酸测定。 拟议作品的最终组成部分重点 关于精制分析方法的应用 叶酸破坏的动力学和食物期间叶酸的保留 准备,处理和存储。

项目成果

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