Core 2: Virology, Molecular, and Histology Core
核心 2:病毒学、分子和组织学核心
基本信息
- 批准号:10215781
- 负责人:
- 金额:$ 0.23万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:
- 财政年份:2019
- 资助国家:美国
- 起止时间:2019-07-24 至 2020-11-30
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:AddressAdherenceAmniotic FluidAnimal ModelAnimalsAntigensBiological AssayBrainCellsCharacteristicsCytomegalovirusCytomegalovirus InfectionsDNADNA Sequence AnalysisDataData AnalyticsDermalDetectionDiseaseDisease OutcomeDrug KineticsEngineeringEnsureEpithelialEpitheliumFetal DiseasesFibroblastsFormalinFrequenciesGenomeGenomicsGliosisGoalsGrowth and Development functionHistologicHistologyHistopathologyImmuneImmune responseImmunologicsInfectionLaboratoriesLiquid substanceMacaca mulattaMeasuresMicrocephalyMolecularMonkeysMonoclonal AntibodiesOutcomeOutputParaffin EmbeddingPathogenesisPathologistPathologyPlacenta DiseasesPlasmaPopulationProceduresProtocols documentationPublishingResourcesRhesusSIVSalivaSamplingSeedsSerial PassageShipsSignal TransductionSourceStatistical Data InterpretationTechniquesTestingTissuesUrineVariantViralViral Load resultVirusVirus DiseasesVirus Replicationadaptive immune responseanimal tissuecalcificationcongenital cytomegalovirusfetalfetal infectionin vitro Assaykidney epithelial celllissencephalypolyclonal antibodyprogramsstatisticstissue tropismtransmission processvirology
项目摘要
ABSTRACT – Virology, Molecular, and Histology Core (Core 2)
It is well known that, despite strict adherence to protocols, hidden or subtle factors that vary among
laboratories can cause techniques such as those concerning virus propagation and qPCR to produce differing
outcomes. Thus, to ensure cross-project consistency, minimize confounding, and maximize impact of results, a
Virology, Molecular, and Histology Core is proposed. This Core will be led by Dr. Peter Barry, who brings to the
Program extant and well established techniques in virus stock propagation and analyses of viral parameters of
infection (including quantification of viral loads, histopathology, and antigen expression). These approaches
are central to rigorous testing of the project's hypotheses addressing the immunologic (Project 1) and virologic
(Project 2) determinants of congenital CMV infection (cCMV), and generating virus stocks for the NHP Core,
purified DAN to assess for emergence/selection of viral variants (Core 3), and quantifiable measures of viral
replication and disease for rigorous statistical analyses (Core 4). Specific outputs of the Virology, Molecular,
and Histology Core are as follows: well-characterized, high titer stocks of epithelial-tropic stocks of RhCMV
(Aim 1), sensitive analyses of tissues and fluids from inoculated animals to quantify RhCMV genome copy
numbers by PCR (qPCR) (Aim 2), and histopathologic/immunohistochemical (IHC) analyses to characterize
viral pathology and antigen expression (Aim 3). Providing singly sourced stocks of virus and sensitive and
specific assays for RhCMV genome copy numbers and antigen expression will enable uniform starting material
and analytic techniques—capabilities that are critical for evaluating the overall objective of this Program: to
define the maternal immune responses and viral characteristics that impact cCMV transmission and the
outcome of fetal infection.
摘要 – 病毒学、分子和组织学核心(核心 2)
众所周知,尽管严格遵守协议,但隐藏的或微妙的因素在不同国家之间存在差异。
实验室可以利用病毒传播和 qPCR 等技术来产生不同的结果
因此,为了确保跨项目的一致性、最大限度地减少混淆并最大限度地提高结果的影响,
提议设立病毒学、分子和组织学核心课程。该核心课程将由 Peter Barry 博士领导,他将带来该核心课程。
病毒母种繁殖和病毒参数分析中现有的和完善的技术
感染(包括病毒载量、组织病理学和抗原表达的量化)。
是严格测试该项目针对免疫学(项目 1)和病毒学的假设的核心
(项目 2)先天性 CMV 感染 (cCMV) 的决定因素,以及为 NHP 核心生成病毒储备,
纯化的 DAN 用于评估病毒变体的出现/选择(核心 3)以及病毒的量化测量
病毒学、分子、复制和疾病的严格统计分析(核心 4)。
和组织学核心如下:RhCMV 上皮亲性原种的特征明确、高滴度原种
(目标 1),对接种动物的组织和体液进行灵敏分析,以量化 RhCMV 基因组拷贝
通过 PCR (qPCR)(目标 2)和组织病理学/免疫组织化学 (IHC) 分析来表征数字
病毒病理学和抗原表达(目标 3)。
针对 RhCMV 基因组拷贝数和抗原表达的特异性检测将实现起始材料的统一
和分析技术——对于评估本计划总体目标至关重要的能力:
定义影响 cCMV 传播的母体免疫反应和病毒特征以及
胎儿感染的结果。
项目成果
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