新規被膜型蛋白質ナノ粒子を用いた細胞性免疫・粘膜免疫誘導型ワクチンの開発

使用新型涂层蛋白纳米颗粒开发细胞介导和粘膜免疫诱导疫苗

基本信息

批准号：
22K18378
负责人：
森田英嗣
金额：
$ 16.64万
依托单位：
Hirosaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

項目1: EPNワクチンの改良: これまでのEPNワクチンについて改良を進め、フェリチン核を除き、Nタンパク質のRNA結合領域を欠損させた被膜粒子に改良することで、粒子形成効率が著しく改善することを見出した。項目2: EPNワクチン経鼻接種による粘膜免疫誘導能の評価: SARS-CoV-2ナノ粒子ワクチンを、アジュバントの存在下でマウスに経鼻投与を行った。ナノ粒子単独投与群よりもアジュバント併用群において，鼻腔洗浄液および気管支肺胞洗浄液中に抗ウイルスIgA抗体・IgG抗体が高く誘導されることを見出した。粘膜免疫誘導には、腸内細菌叢が重要な役割を果たしているが、アジュバント単独投与群でも腸内細菌叢と抗体アイソタイプに変化がおこることを明らかにした。項目3: EPNワクチンのCTL誘導能の評価と生体内動態解析: 本年度は、SARS-CoV-2 SあるいはNを発現させたDC2.4/SARS-CoV-S細胞、DC2.4/SARS-CoV-N細胞におけるウイルス抗原の発現をウエスタンブロット法で確認した。一方、SARS-CoV-2特異的CD8+CTLの誘導を指標としたSARS2-EPNの評価を行うため、陽性コントロールを用いた実験系の構築を進めた。OVA抗原特異的TCRトランスジェニックマウス（OT-I）を用いてCD8+T細胞応答をCSFEラベルFACS法にて確認した。項目4: SARS-CoV-2感染に対するEPNワクチンの機能評価: SARS-CoV-2ワクチンの有効性をより詳細に評価するため、ヒトACE２を全身に発現するTgマウスを新たに導入し、SARS-CoV-2の感染モデルを立ち上げた。このTgマウス感染モデルを用いることで、ワクチンの感染防御効果をマウスの生存率にて迅速に評価可能となり、また、EPNワクチンの強みであると予想されるCTL誘導の評価も可能となった。

第 1 项：EPN 疫苗的改进：我们通过去除铁蛋白核心并创建缺少 N 蛋白 RNA 结合区域的包被颗粒来改进现有的 EPN 疫苗，我发现这导致颗粒形成效率显着提高。它。第2项：通过鼻部接种EPN疫苗诱导粘膜免疫能力的评价：在佐剂存在下对小鼠鼻腔施用SARS-CoV-2纳米颗粒疫苗。我们发现，与纳米颗粒给药组相比，佐剂给药组在鼻腔和支气管肺泡灌洗液中诱导出更高程度的抗病毒 IgA 和 IgG 抗体。肠道菌群在诱导粘膜免疫方面发挥着重要作用，我们发现即使在单独施用佐剂的组中，肠道菌群和抗体同种型也发生了变化。第3项：EPN疫苗的CTL诱导能力评价及体内动力学分析：今年我们将使用表达SARS-CoV-2 S或N的DC2.4/SARS-CoV-S细胞，DC2.4/SARS-CoV -通过蛋白质印迹证实N细胞中病毒抗原的表达。同时，为了以SARS-CoV-2特异性CD8+ CTL的诱导为指标来评估SARS2-EPN，我们继续构建了使用阳性对照的实验系统。使用 OVA 抗原特异性 TCR 转基因小鼠 (OT-I)，通过 CSFE 标记的 FACS 方法确认 CD8+ T 细胞反应。第 4 项：EPN 疫苗针对 SARS-CoV-2 感染的功能评估：为了更详细地评估 SARS-CoV-2 疫苗的有效性，我们新引入了全身表达人类 ACE2 的 Tg 小鼠，以及 SARS-CoV- 2. 我们推出了 CoV-2 感染模型。通过使用这种Tg小鼠感染模型，可以根据小鼠的存活率快速评估疫苗对感染的保护效果，还可以评估CTL诱导，这有望成为EPN疫苗的强项。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

ESCRT-mediated plasma membrane shaping

ESCRT介导的质膜成形

DOI：
10.1016/b978-0-323-89911-6.00003-0
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Morita Eiji
通讯作者：
Morita Eiji

宿主小胞体関連分解システムによるフラビウイルス非構造蛋白質の選択的分解の意義

宿主内质网相关降解系统选择性降解黄病毒非结构蛋白的意义

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
荒川将志;石田幸太郎;田端桂介;西野美都子;甲賀大輔;加藤薫;森田英嗣
通讯作者：
森田英嗣

Scientific evaluation of alleged findings in HPV vaccines: Molecular mimicry and mouse models of vaccine‐induced disease

对 <scp>HPV</scp> 疫苗中所谓发现的科学评估：疫苗诱发疾病的分子拟态和小鼠模型

DOI：
10.1111/cas.15482
发表时间：
2022-10
期刊：
影响因子：
5.7
作者：
Matsumura Noriomi;Tsunoda Ikuo
通讯作者：
Tsunoda Ikuo

Effectiveness of exercise interventions in animal models of multiple sclerosis

运动干预对多发性硬化症动物模型的有效性

DOI：
10.3389/fmed.2023.1143766
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
3.9
作者：
Parnow Abdolhossein;Hafedh Muthanna;Tsunoda Ikuo;Patel Darpan I.;Baker Julien S.;Saeidi Ayoub;Bagchi Sovan;Sengupta Pallav;Dutta Sulagna;Luszczki Edyta;Stolarczyk Artur;Oleksy Lukasz;Al Kiyumi Maisa Hamed;Laher Ismail;Zouhal Hassane
通讯作者：
Zouhal Hassane

がん細胞における細胞外小胞の形成に関わる新規ArfGAPsの同定

鉴定参与癌细胞细胞外囊泡形成的新型 ArfGAP