受容体GPR75を介した過食・肥満の新規メカニズム解明と抗肥満薬シーズの探索

阐明受体GPR75介导的暴饮暴食和肥胖新机制并寻找抗肥胖药物种子

基本信息

批准号：
22K19245
负责人：
上野山賀久
金额：
$ 4.08万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19245/
关键词：
過食肥満

项目摘要

本研究の目的は、先行研究において抗肥満薬の標的となる可能性を見いだしたGタンパク質共役受容体GPR75を介した過食・肥満のメカニズムを解明し、さらに、生殖機能に全く毒性を示さない抗過食・抗肥満薬のシーズとなるGPR75拮抗剤を探索することである。そのため、モデル動物であるラットを用いて、高脂肪食による過食や肥満におけるGPR75シグナリングの役割について検討した。高脂肪食あるいは通常食を給与したラットから、様々な臓器を採取し、過食、肥満、糖・脂質の代謝異常に関わる候補因子の遺伝子発現を検討し、これらの原因となる候補遺伝子を複数見出した。さらに、GPR75発現細胞の局在を明らかにするために、野生型ラットより臓器を採取し、ウエスタンブロットあるいは組織学的な解析 (免疫組織化学、in situ hybridization) を行った。GPR75欠損ラットにおいて頻回採血を行い、GPR75欠損ラットが野生型ラットと変わらない黄体形成ホルモンのパルス状分泌を示すことを明らかにした。さらに、交配実験により、GPR75欠損ラットが繁殖可能であることを明らかにした。また、HEK293細胞を用いたGPCR活性化測定法 (TGFa切断アッセイ) を立ち上げ、GPR75内因性リガンド候補による予備試験を実施し、低分子化合物ライブラリー (8万化合物) を用いたGPR75作動薬、拮抗薬の探索の準備を進めた。

本研究的目的是阐明G蛋白偶联受体GPR75介导的暴饮暴食和肥胖机制，该受体是前期研究中发现的抗肥胖药物的潜在靶点，并开发一种抗肥胖药物对生殖功能完全无毒，目标是寻找 GPR75 拮抗剂，它可以作为抗暴饮暴食和抗肥胖药物的种子。因此，我们利用大鼠模型研究了 GPR75 信号在高脂饮食引起的暴饮暴食和肥胖中的作用。从喂食高脂肪饮食或正常饮食的大鼠身上采集各种器官，研究与暴饮暴食、肥胖以及糖脂代谢异常相关的候选因子的基因表达，发现了多个与这些相关的候选基因。塔。此外，为了阐明GPR75表达细胞的定位，从野生型大鼠收集器官并进行蛋白质印迹或组织学分析（免疫组织化学、原位杂交）。我们对 GPR75 缺陷型大鼠进行了频繁的血液采样，发现 GPR75 缺陷型大鼠表现出与野生型大鼠类似的黄体生成素的脉动分泌。此外，交配实验表明，GPR75 缺陷的大鼠能够繁殖。此外，我们推出了使用HEK293细胞的GPCR激活测量方法（TGFa裂解测定），使用GPR75内源配体候选物进行了初步测试，并使用小分子化合物库（80,000种化合物）开发了GPR75激动剂和GPR75激动剂制剂。去寻找对手。